糖类组学与脂质组学杂志
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使用斑马鱼表征脊椎动物胚胎中的 N-肉豆蔻酰转移酶：低分子量 N-肉豆蔻酰转移酶 1 在早期发育中的出现

Hajime Nakatani、Natsuki Nukada、Eriko AvÅŸar-Ban、Hisayoshi Ishikawa、Shin'ichi Akiyama 和 Yutaka Tamaru

为了探索脊椎动物胚胎发生过程中 NMT 的生物学特征，我们首先将斑马鱼作为高等生物的有用模型。通过氨基酸序列的计算机分析，我们发现由nmt1a和nmt2基因翻译而来的斑马鱼NMT1（zNMT1）和zNMT2分别与人类或小鼠NMT1和NMT2具有高度同源性。通过RT-PCR和RNA印迹对nmt1a和nmt2的表达分析表明，这两个基因在早期发育过程中表达，并且nmt2表达是主要的初始发育阶段。2-羟基肉豆蔻酸 (2-OHMyr) 在早期发育过程中抑制 zNMT 会导致胚胎死亡。针对 nmt1a 的吗啉代反义寡核苷酸导致早期外胚层发育停滞。这些结果表明 zNMT 对于早期外胚层阶段后的发育是必需的。然后制备重组zNMT1并确认其N-肉豆蔻酰转移酶活性。最后，我们分析了zNMT1蛋白在几个发育阶段的胚胎中的表达，发现低分子量zNMT1（29 kDa），包括zNMT1的N端部分，在胚胎发育过程中特异出现。在 C 端融合 myc-His 标签的全长 zNMT1 的表达导致产生低分子量蛋白质 (35 kDa)。对早期胚胎蛋白质提取物中完整 NMT 的检测表明，存在具有底物结合活性的低分子量 NMT。从这些发现中，我们得出结论，zNMT 与哺乳动物一样，对于斑马鱼的发育也至关重要，并且低分子量的 zNMT1 专门出现在早期发育阶段。