色谱与分离技术杂志
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RP-HPLC 法测定胰腺癌细胞和小鼠异种移植物中的天然蛋白激酶 C 抑制剂 Rottlerin

Qing-Yi Lu、Lifeng Zhang、Aurelia Lugea、Aune Moro、Mouad Edderkaoui、Guido Eibl、Stephen J. Pandol 和 Vay-Liang W. Go

Rottlerin 是从 Mallotus phillippinensis 的果皮中分离出来的天然多酚酮。在之前的研究中，我们表明，胃肠外给予 Rottlerin 可以减少小鼠胰腺癌异种移植模型中的肿瘤生长。本研究的目的是开发一种简单且经过验证的方法，用于定量测定饲喂鹿角蛋白饮食的小鼠血浆和肿瘤组织中的鹿角蛋白。裸鼠皮下注射2×106 HPAF-II细胞制备胰腺癌异种移植模型。肿瘤植入前一周，将小鼠随机分配至标准饮食（AIN76A）和添加0.012% Rottlerin 的标准饮食补充剂（每组n = 6）。节食六周后处死小鼠。采用蛋白沉淀-萃取的方法从血浆和组织中提取Rottlerin，并通过反相HPLC-DAD方法进行分析。还应用相同的 HPLC 方法来测定条件培养基和暴露于 25 μM 浓度的 Rottlerin 的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中的 Rottlerin 水平。在喂食鹿角蛋白饮食的小鼠中，在肿瘤（2.11 ± 0.25 nmol/g 组织）和血浆（2.88 ± 0.41 μM）中检测到大量的鹿角蛋白。此外，在经 Rottlerin 处理的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中检测到显着水平的 Rottlerin（57.4 ± 5.4 nmol/mg 蛋白质）。这些数据表明 Rottlerin 在体内和体外均被细胞和组织有效吸收，并表明 Rottlerin 作为胰腺癌的预防或辅助补充剂的巨大潜力。还应用相同的 HPLC 方法来测定条件培养基和暴露于 25 μM 浓度的 Rottlerin 的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中的 Rottlerin 水平。在喂食鹿角蛋白饮食的小鼠中，在肿瘤（2.11 ± 0.25 nmol/g 组织）和血浆（2.88 ± 0.41 μM）中检测到大量的鹿角蛋白。此外，在经 Rottlerin 处理的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中检测到显着水平的 Rottlerin（57.4 ± 5.4 nmol/mg 蛋白质）。这些数据表明 Rottlerin 在体内和体外均被细胞和组织有效吸收，并表明 Rottlerin 作为胰腺癌的预防或辅助补充剂的巨大潜力。还应用相同的 HPLC 方法来测定条件培养基和暴露于 25 μM 浓度的 Rottlerin 的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中的 Rottlerin 水平。在喂食鹿角蛋白饮食的小鼠中，在肿瘤（2.11 ± 0.25 nmol/g 组织）和血浆（2.88 ± 0.41 μM）中检测到大量的鹿角蛋白。此外，在经 Rottlerin 处理的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中检测到显着水平的 Rottlerin（57.4 ± 5.4 nmol/mg 蛋白质）。这些数据表明 Rottlerin 在体内和体外均被细胞和组织有效吸收，并表明 Rottlerin 作为胰腺癌的预防或辅助补充剂的巨大潜力。在喂食鹿角蛋白饮食的小鼠中，在肿瘤（2.11 ± 0.25 nmol/g 组织）和血浆（2.88 ± 0.41 μM）中检测到大量的鹿角蛋白。此外，在经 Rottlerin 处理的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中检测到显着水平的 Rottlerin（57.4 ± 5.4 nmol/mg 蛋白质）。这些数据表明 Rottlerin 在体内和体外均被细胞和组织有效吸收，并表明 Rottlerin 作为胰腺癌的预防或辅助补充剂的巨大潜力。在喂食鹿角蛋白饮食的小鼠中，在肿瘤（2.11 ± 0.25 nmol/g 组织）和血浆（2.88 ± 0.41 μM）中检测到大量的鹿角蛋白。此外，在经 Rottlerin 处理的 HPAF-II 细胞的细胞裂解物中检测到显着水平的 Rottlerin（57.4 ± 5.4 nmol/mg 蛋白质）。这些数据表明 Rottlerin 在体内和体外均被细胞和组织有效吸收，并表明 Rottlerin 作为胰腺癌的预防或辅助补充剂的巨大潜力。