农业科学与食品研究杂志
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抽象的

开发用于检测香蕉束顶病毒的Rapidot免疫测定法

Namratha ND、Narayan BM、Chougal A 和 Chidanand AR

使用 BBTV 作为抗原，利用噬菌体展示技术生产单链片段可变 (scFv) 抗体。选择在单克隆 ELISA 中显示最高读数的两个克隆，即 pBSNMAB5 和 pBSNMAB40。pBSNMAB5和pBSNMAB40的单链抗体片段被亚克隆到pQUANTa体表达载体中，该载体能够与scFv单克隆抗体片段和编码碱性磷酸酶(PhoA)酶的基因转录融合。使用 LMB3 正向引物和 pHEN 反向引物对克隆进行测序并进行表征。两个克隆的 scFv 基因均长 795 bp，并且发现它们具有相似的同源序列。BLASTn和BLASTx分析结果表明与合成构建体抗TNFα单链Fv抗体基因有85%同源性，部分cds和进一步的BLASTx分析表明与循环B细胞抗体重链可变区（智人）有86％的同源性。克隆表达后，产生ALP与pBSNMAB5和pBSNMAB40单克隆抗体的融合蛋白。scFv-ALP 缀合物是针对 BBTV 蛋白生产的。使用该抗体偶联物开发了检测试剂盒。该 Rapidot 免疫诊断试剂盒可检测 NC 膜和膜盒中浓度低至 0.9 g/ml 的 BBTV，并且还与其他蛋白质进行交叉检查，以评估针对 BBTV 产生的单克隆的特异性。scFv-ALP 缀合物是针对 BBTV 蛋白生产的。使用该抗体偶联物开发了检测试剂盒。该 Rapidot 免疫诊断试剂盒可检测 NC 膜和膜盒中浓度低至 0.9 g/ml 的 BBTV，并且还与其他蛋白质进行交叉检查，以评估针对 BBTV 产生的单克隆的特异性。scFv-ALP 缀合物是针对 BBTV 蛋白生产的。使用该抗体偶联物开发了检测试剂盒。该 Rapidot 免疫诊断试剂盒可检测 NC 膜和膜盒中浓度低至 0.9 g/ml 的 BBTV，并且还与其他蛋白质进行交叉检查，以评估针对 BBTV 产生的单克隆的特异性。