热力学与催化杂志
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质子键对氨基糖苷核苷酸转移酶 (2³)-Ia 酶-抗生素复合物热力学性质的影响

爱德华·赖特和恩金·H·塞尔珀苏

氨基糖苷核苷酸转移酶(2″)-Ia (ANT) 催化某些氨基糖苷类抗生素的共价修饰，并赋予拥有该酶的细菌耐药性。使用两种结构相似的底物（卡那霉素 A 和卡那霉素 B）和结构不同的抑制剂（新霉素）进行等温滴定量热法 (ITC) 实验，以确定 pH 和质子键对酶-氨基糖苷复合物热力学性质的影响。数据显示，与新霉素或卡那霉素B的2'-氨基相互作用的酶上的一个或多个羧基的pKa降低。该位点的质子化状态对配体与ANT的结合亲和力产生显着影响。ITC 实验还表明，与卡那霉素相比，新霉素在较高 pH 值下亲和力的损失并不明显。这种差异是由于游离新霉素的 pKa 较高而导致的，其在 ANT-新霉素复合物中向上移动。这两个因素不能完全解释亲和力的降低以及高于和低于最佳 pH 值时结合质子化的差异。因此，ANT-氨基糖苷复合物的形成涉及配体和酶上多个官能团的质子化和去质子化，这也有助于复合物形成的pH分布。这两个因素不能完全解释亲和力的降低以及高于和低于最佳 pH 值时结合质子化的差异。因此，ANT-氨基糖苷复合物的形成涉及配体和酶上多个官能团的质子化和去质子化，这也有助于复合物形成的pH分布。这两个因素不能完全解释亲和力的降低以及高于和低于最佳 pH 值时结合质子化的差异。因此，ANT-氨基糖苷复合物的形成涉及配体和酶上多个官能团的质子化和去质子化，这也有助于复合物形成的pH分布。