糖生物学杂志
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流式凝集素亲和层析——黑接骨木凝集素模型

M Luísa S Silva、Catarina Gomes 和 M Beatriz Quinaz Garcia

蛋白质组研究已成为评估疾病状况变化的重要方法。尽管如此，高丰度血清蛋白的主导地位使可能构成潜在疾病生物标志物的低丰度糖蛋白的发现和分析变得显着复杂化。已使用多种技术进行血清蛋白质组分配，例如基于蛋白质 A 和 G、禽 IgY、单克隆抗体和凝集素的亲和层析。凝集素特别适合结合和选择性分离复杂样品（如生物样品）中存在的某些聚糖结构。凝集素可逆地捕获样品中以不同丰度存在的具有特定糖结构的糖蛋白，在洗脱后产生用于糖蛋白质组研究的富集糖蛋白库。

然而，用于生化应用的凝集素亲和层析（LAC）主要在批量条件下进行，这意味着较长的操作时间、昂贵的试剂或柱以及特殊的设备或装置。这项工作建议使用黑接骨木凝集素开发一种实验室制作且易于实施的流式 LAC 程序(SNA) 固定在琼脂糖珠上，以分离癌症患者血清糖蛋白中存在的 STn 聚糖（一种泛癌生物标志物）。在流动条件下，所提出的 LAC 程序允许过程自动化，当需要运行多个样品时尤其重要。此外，该流动系统不需要昂贵的安装或经验丰富的人员，并且可以根据糖蛋白质组分析的目的进行定制，以使用任何凝集素进行 LAC。

意义：这项工作旨在证明与生物化学和分子生物学实验室通常进行的批量程序相比，在流动条件下和使用非常简单的流动歧管进行凝集素亲和色谱的可行性和优势。这种简单的歧管易于实施，不需要昂贵的设备或装置，因此可以在任何实验室中使用，甚至在财务有限的实验室中也是如此。与使用批量程序或商业试剂盒或色谱柱相比，指出了所开发方法的几个优点，特别是在需要进行常规分析时。