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高通量生物测定和HPLC-UV方法测定生物样品中苍术及其生物活性成分阿昔洛丁的生物活性：在晚期胆管癌患者药代动力学研究中的应用

Anurak Cheoymang、Nadda Muhamad、Inthuon Kulama、Kesara Na-Bangchang*

本研究旨在建立一种高通量生物测定方法，用于测定人血清样品中茅术（AL）的总生物活性。此外，还开发了一种简单的HPLC-UV方法来测定AL的主要生物活性成分苍术素（ATD）的血浆浓度。对于生物测定方法，金黄色葡萄球菌（S. aureus）ATCC 25923菌株用作测试微生物。使用MTT测定评估细菌生长的抑制作用。校准曲线由血清中的浓度响应曲线（0、0.39、0.78、1.56、3.13、2.56 和 50 ng/μl）绘制，呈线性，相关系数优于 0.990。使用 20 µl 血清样品的定量限 (LOQ) 为 1.66 µg/ml。HPLC-UV 测定程序是基于反相色谱法开发的，使用 Hypersil Gold C18 柱和由乙腈和水组成的比例为 70:30 (v:v) 的洗脱溶剂。紫外检测波长设定为340 nm。校准曲线根据血清浓度-反应曲线（0、0.39、0.78、1.56、3.13、2.56 和 50 ng/μl）绘制，线性相关系数 (r) 优于 0.990。LOQ 为 2。使用 1 ml 血浆样品为 5 ng/ml。两种测定方法均可对 AL 的血清生物活性和 ATD 的血浆浓度进行特异性、灵敏、准确和可重复的定量分析。该方法成功应用于5例晚期胆管癌患者的AL提取物总生物活性（抗胆管癌活性）的药代动力学研究。