糖类组学与脂质组学杂志
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用于研究哺乳动物细胞糖组学的芘衍生糖肽的定量基质辅助激光解吸/电离质谱分析

中村俊夫、西风隆、真明浩、东崎文雄、杉本一郎和天野纯子

聚糖是主要的富含信息的生物分子之一。N-聚糖的改变可能与包括癌症在内的许多疾病有关，并且经常在受影响患者的血清中观察到。例如，前列腺特异性抗原（PSA）是前列腺上皮细胞分泌的一种糖蛋白。血清 PSA 测定广泛用于检测前列腺癌 (PCa)。检测改变的 PSA 聚糖被认为是精确的诊断。然而，可用的血清 PSA 量有限，因此很难确定详细的聚糖结构，因为血清中的 PSA 水平非常低。

质谱 (MS) 是分析聚糖结构的强大工具。我们最近通过芘衍生化建立了一种针对聚糖和糖肽的高灵敏度质谱仪。将芘丁酸酰肼 (PBH) 衍生的聚糖的基质辅助激光解吸/电离四极离子阱飞行时间 (MALDI-QIT-TOF) 质谱与吡啶胺化 (PA) 聚糖的质谱进行比较。每种衍生聚糖均由相同量的商业 PSA 制备。与 PA 聚糖相比，PBH 标记的 PSA 聚糖显示出更高的信号强度和更少的碎片，并且给出了具有高信噪比的光谱（在正离子和负离子模式下）。为了衍生化糖肽，使用芘基重氮甲烷（PDAM）。这种衍生化大大增强了糖肽信号。

在这项研究中，我们证明，与 HPLC 和凝集素亲和色谱相比，使用芘衍生化的 MS 分析可为聚糖和糖肽提供更高的灵敏度和稳定性；此外，还获得了与其他方法相当的结果。因此，我们得出结论，我们的方法可用于哺乳动物细胞糖组学的研究。