临床和细胞免疫学杂志
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纳升液滴微阵列中 T 细胞动态激活和功能分析

Saheli Sarkar、Vinny Motwani、Pooja Sabhachandani、Noa Cohen 和 Tania Konry

目的：表征免疫反应的异质性需要评估动态单细胞反应以及各种免疫细胞亚群之间的相互作用。效应细胞的成熟和激活由细胞接触依赖性和可溶性因子介导的旁分泌信号调节。目前，很少有方法可以同时动态研究这两个过程，而无需物理限制非贴壁细胞并消除相邻细胞对的串扰。我们在此描述了一种微流体液滴微阵列平台，该平台允许对单细胞反应进行快速功能分析和异型细胞对的共封装，从而使我们能够评估原代T细胞的动态激活状态。
方法：微流控液滴平台能够生成和对接单分散纳升体积 (0.523 nL) 液滴，每次实验能够监测一千个液滴。单个人类 T 细胞被封装在液滴中，并在芯片上用钙离子载体离子霉素进行刺激。T 细胞还与卵清蛋白肽激活的树突状细胞共封装，然后进行动态钙信号监测。
结果：与对照组相比，离子霉素刺激的细胞显示出钙信号传导的波动。两种细胞群的反应均表现出明显的异质性。在与 DC 接触后立即在 T 细胞中观察到钙信号传导，表明存在早期激活信号。T细胞进一步表现出非接触介导的钙水平增加，尽管这种反应与接触介导的信号相比有所延迟。
结论：我们的结果表明，这种基于纳升液滴阵列的微流体平台是一种有前途的技术，可用于评估各种类型细胞反应的异质性、检测早期/延迟信号事件以及免疫细胞的活细胞表型分析