蛋白质组学与生物信息学杂志
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血清蛋白质组学二维聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化

拉朱 VS 拉贾拉

血清蛋白质组分析为疾病诊断和治疗监测提供了一种潜在有前途的方法。然而，血清中蛋白质动态范围大、蛋白质丰度高、盐和脂质过量，使得分析非常具有挑战性。因此，提高二维凝胶电泳（2-DE）中蛋白质的溶出度，增强在多种生理条件下分析血清蛋白质组的能力势在必行。本研究检验了去除高丰度蛋白质、沉淀方法、热 SDS 处理和不同 pH 值的 IPG 条带的各种组合对小鼠血清 2-DE 图的影响。最后用ProteoExtractTM白蛋白去除柱去除血清中的高丰度蛋白质，乙醇沉淀，用2.5% SDS和2.3% DTT加热使样品在95℃变性3分钟，一般推荐在pH 4-7 IPG试纸条（17cm）上进行IEF和100 µg贫血清蛋白，通过银染进行2-DE血清蛋白质组分析，可有效提高低丰度蛋白质的分辨率和强度。优化的条件有助于产生更好的参考血清样品 2-DE 凝胶，用于识别潜在的新型疾病标志物。