JM沃内克
简介：线虫粪类圆线虫是类圆线虫病的病原体，人类可出现皮肤病、肺部和肠道症状，经常发展为慢性疾病。粪类圆线虫感染的诊断通常是通过在面部找到寄生虫的幼虫来进行的。幼虫产量比十二指肠钩口虫的卵产量少几个数量级，因此常规技术的敏感性较差。通过特殊技术可以提高敏感性，但仍可能漏掉感染。类圆线虫病可能是免疫功能低下患者的潜在严重感染。因此，需要提供灵敏且特异的诊断方法，尤其是对于免疫抑制患者，类圆线虫病的诊断和治疗至关重要。尤其是免疫功能低下的患者。本研究旨在评估用于诊断人类类圆线虫病的血清学和分子方法，这些方法来自先前通过寄生虫学方法进行分析的免疫抑制患者的样本。在本研究中，血清学和分子工具用于诊断 几种血清学方法，因为基于粪便的显微镜检查和培养技术缺乏敏感性；DNA 检测已证明具有高灵敏度和特异性的可重复结果，血清抗体的检测被视为诊断的替代方法，DNA 提取是根据先前描述的方法 12 进行的。简要地，将约 500 mg 保存在 70% 乙醇中的粪便样本在 PBS 中清洗两次。所得沉淀用于 DNA 提取，我们还使用复合参考标准评估了五种不同血清学测试的准确性，线虫广泛分布在世界各地，在卫生条件差的地区允许其传播。在人类宿主中，感染的特点是自身感染周期，如果不及时治疗，可能会导致寄生虫终生携带，这是通过结合不同测试的结果得出的。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。所得沉淀用于 DNA 提取，我们还使用复合参考标准评估了五种不同血清学测试的准确性，线虫广泛分布在世界各地，在卫生条件差的地区允许其传播。在人类宿主中，感染的特点是自身感染周期，如果不及时治疗，可能会导致寄生虫终生携带，这是通过结合不同测试的结果得出的。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。所得沉淀用于 DNA 提取，我们还使用复合参考标准评估了五种不同血清学测试的准确性，线虫广泛分布在世界各地，在卫生条件差的地区允许其传播。在人类宿主中，感染的特点是自身感染周期，如果不及时治疗，可能会导致寄生虫终生携带，这是通过结合不同测试的结果得出的。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。线虫广泛分布于世界各地，在卫生条件较差的地区仍能维持其传播。在人类宿主中，感染的特点是自身感染周期，如果不及时治疗，可能会导致寄生虫终生携带，这是通过结合不同测试的结果得出的。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。线虫广泛分布于世界各地，在卫生条件较差的地区仍能维持其传播。在人类宿主中，感染的特点是自身感染周期，如果不及时治疗，可能会导致终生携带寄生虫，这是通过结合不同测试的结果得出的。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。最近开发的 NIE-LIPS 几乎具有 100% 特异性，敏感性 >80% 类圆线虫感染。在这里，我们评估了完全独特的抗类圆线虫 IgG ELISA 的分析性能。
方法：抗类圆线虫 ELISA IgG（Euroimmun AG，Lbeck，德国）基于从乳头圆线虫制备的抗原。评估 ELISA 的敏感性和特异性，理想情况下，测试应呈阴性或在成功治疗后的可预测时间内持续显示滴度显着下降。酶底物邻苯二胺与 0.03% 过氧化氢溶解在 0.1 mol/L 柠檬酸盐磷酸盐缓冲液中 尽管一些研究证明有效处理后抗体效价下降，多项研究支持这样的观点，即寄生虫特异性抗体的检测可能是对寄生虫学诊断的有用补充。诊断免疫学方法包括酶联免疫吸附测定，与血清学参考标准相比，尚未确定明确的截止值申请于瑞士伯尔尼大学寄生虫学研究所。适当的诊断测试对于发现粪圆线虫感染个体和评估人群中的感染流行率至关重要。粪类圆线虫的主要问题之一是，其总体患病率可能被低估，主要是由于基于粪便的测试缺乏敏感性，而粪便测试是最常用的粪类圆线虫感染评估方法。血清学检测也非常有用，但根据内部 ELISA 参考，它们的特异性是可变的抗类圆线虫抗体阳性血清。特异性/交叉反应性小组包括 39 份对照血清，分类为抗类圆线虫抗体阴性或其他寄生虫抗体阳性，包括来自其他寄生虫感染患者的样本（棘球蚴、丝虫、蛔虫、弓蛔虫、旋毛虫、片形吸虫、血吸虫、鞭毛虫、阿米巴原虫、利什曼原虫、疟原虫、多重感染；n=25）、癌症患者（n=5）和健康献血者（n=9）。边缘结果被认为是积极的。特异性/交叉反应性小组包括 39 份对照血清，分类为抗类圆线虫抗体阴性或其他寄生虫抗体阳性，包括来自其他寄生虫感染患者的样本（棘球蚴、丝虫、蛔虫、弓蛔虫、旋毛虫、片形吸虫、血吸虫、鞭毛虫、阿米巴原虫、利什曼原虫、疟原虫、多重感染；n=25）、癌症患者（n=5）和健康献血者（n=9）。边缘结果被认为是积极的。特异性/交叉反应性小组包括 39 份对照血清，被分类为抗类圆线虫抗体阴性或其他寄生虫抗体阳性，包括来自其他寄生虫感染患者的样本（棘球蚴、丝虫、蛔虫、弓蛔虫、旋毛虫、片形吸虫、血吸虫、鞭毛虫、阿米巴原虫、利什曼原虫、疟原虫、多重感染；n=25）、癌症患者（n=5）和健康献血者（n=9）。边缘结果被认为是积极的。
结果：使用抗类圆线虫 ELISA 获得的结果与所有样品中 94.6% (53/56) 的参考测试一致。在敏感性小组中，将抗类圆线虫 ELISA 每种方法的结果与寄生虫学方法的结果进行比较，并通过 Kappa 系数 (k) 确定一致程度。统计显着性设定为 p < 0.05。16/17 血清呈阳性，敏感性为 94.1%。血清产生的结果不一致，类圆线虫病的诊断取决于通过浓缩技术或从多重感染患者收集的培养物来鉴定粪便标本中的幼虫。在对照样本中，2/39 例（1 名癌症患者和 1 名献血者）呈阳性，特异性为 94.9%。