国际标准期刊号: 2161-0940
Kiem X Trinh、Pham Van Thuc、Chu Thi My、Long X Trinh、Thuc Thi Minh Vu、Bao Khanh Nguyen、Francis Markland J、Stephen Sweenson 和 Radu Minea
目标:越南是一个热带农业国家。每年有 30,000 起蛇咬伤事件。两个毒蛇家族造成了严重的医疗问题。其中,Calloselasma Rhodostoma (CR) 是最危险的蛇。因此,自2001年起,越南(VN)与南加州大学(USC)之间建立了科研合作关系。自2014年以来,该项目已获得越南政府批准。第一个项目的目的是建立从VN CR毒液中纯化dsintegrin(CRd.VN)的工艺流程,以确定其分子量、结构及其生物抗肿瘤活性。
方法:从 VN 收集、冻干 CR 毒液的过程。CR毒液的蛋白质浓度通过BCA测定法测定。使用高效液相色谱(HPLC)、SDS-PAGE、质谱(MS)分析和胰蛋白酶消化测序来纯化CRd.VN及其分子量(MW)和结构。采用标准细胞生物学方法来表征CRd(体外)抑制肿瘤细胞的血小板聚集、粘附、迁移和侵袭的能力。在乳腺癌 (BC) 小鼠模型(体内)中测试了其抗癌活性。
结果: HPLC (CRd.VN) 的峰 7 在 SDS-PAGE 凝胶上显示单个 ~10 kDa 带。CRd.VN的分子量、结构和序列为7.33 kDa,是含有68个氨基酸的单体,具有RGD基序(位置49-51)和6个二硫键。CRd.VN的抗癌活性非常强。
结论:我们已经证明 CRd.VN 是一种可能的具有临床潜力的抗肿瘤药物。然而,CRd 重组生产、初步药代动力学/毒理学特性和抗肿瘤活性还需要进一步研究。