临床和细胞免疫学杂志
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用干扰素-α激活肺泡巨噬细胞通过 Nrf2-ARE 途径促进抗氧化防御

Bashar S Staitieh、Eduardo E Egea、Xian Fan1、Nnamdi Azih、Wendy Neveu 和 David M Guidot

巨噬细胞的表型和功能取决于潜在的微环境。许多疾病都伴随着巨噬细胞极化状态的异常变化，这限制了细胞成为先天免疫效应器的能力。该领域之前的研究表明，长期饮酒与先天免疫效应巨噬细胞的转变有关，也与对氧化应激的反应不足有关。因此，我们假设对氧化应激的最佳反应取决于巨噬细胞成为先天免疫效应细胞的能力。为了研究这一假设，我们首先证实我们可以将 NR8383 细胞（一种大鼠肺泡巨噬细胞系）可重复地极化为典型的 M1 和 M2 状态（分别使用 IFN-γ 和 IL-4）。然后，我们使用 Amplex red 测定测试了极化细胞清除葡萄糖氧化酶 (GOX) 产生的活性氧的能力，发现 IFN-γ 极化细胞具有更强的清除能力。为了阐明氧化应激反应增强的机制，我们评估了抗氧化反应的关键组成部分；具体来说，核因子（红细胞衍生2）样2（Nrf2）是负责细胞对氧化应激反应的主转录因子，及其下游效应子之一谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）。我们发现这两种蛋白在 IFN-γ 极化细胞中显着上调。为了确认 Nrf2 是这种改善的抗氧化反应的一个组成部分，我们用 Nrf2 沉默 RNA 或对照沉默 RNA 转染 IFN-γ 极化细胞，发现 si-Nrf2 处理的细胞中过氧化氢清除功能显着受损。此外，在没有 IL-4 的情况下，用 si-Nrf2 转染未处理的细胞，使它们极化为 M2 表型，这表明 Nrf2 在巨噬细胞极化中的机制作用。然后，我们在原代大鼠肺泡巨噬细胞中证实了我们的几个关键实验。综上所述，这些发现表明 M1 极化状态对于巨噬细胞对氧化应激的最佳反应是必要的，并且这种反应是通过 Nrf2 及其下游效应器介导的。用si-Nrf2转染未处理的细胞，在没有IL-4的情况下将它们极化为M2表型，这表明Nrf2在巨噬细胞极化中的机制作用。然后，我们在原代大鼠肺泡巨噬细胞中证实了我们的几个关键实验。综上所述，这些发现表明 M1 极化状态对于巨噬细胞对氧化应激的最佳反应是必要的，并且这种反应是通过 Nrf2 及其下游效应器介导的。用si-Nrf2转染未处理的细胞，在没有IL-4的情况下将它们极化为M2表型，这表明Nrf2在巨噬细胞极化中的机制作用。然后，我们在原代大鼠肺泡巨噬细胞中证实了我们的几个关键实验。综上所述，这些发现表明 M1 极化状态对于巨噬细胞对氧化应激的最佳反应是必要的，并且这种反应是通过 Nrf2 及其下游效应器介导的。