临床与实验眼科学杂志
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年龄相关性皮质白内障晶状体组织中 ERCC6 基因表达和 DNA 甲基化谱的改变

王勇、张国伟、李飞、康利华、贲金东、韩荣、关怀金

紫外线 (UV) 诱导的 DNA 损伤归因于年龄相关性白内障 (ARC) 的发病机制，并通过核苷酸切除修复 (NER) 进行修复。已知ERCC6编码的Cockayne综合征互补组B（CSB）蛋白是NER复合物的组成部分。DNA 甲基化是主要的表观遗传事件之一，由 DNA 5-胞嘧啶甲基转移酶 (DNMT) 催化。本研究旨在探讨晶状体组织中 ERCC6 启动子区 CpG 岛 DNA 甲基化对 ARC 发病机制的潜在贡献。本研究包括来自人类受试者的 15 种皮质型 ARC 镜片和 15 种透明镜片。通过 qRT-PCR 和蛋白质印迹分析晶状体中 ERCC6 和 DNMT 的表达。进行亚硫酸氢盐测序 PCR (BSP) 以评估 ERCC6 的甲基化状态。通过在人晶状体上皮细胞 B-3 (HLE B-3) 中添加去甲基化剂 5-aza-2'-脱氧胞苷 (5-aza-dC) 进行体外实验，以确认 DNA 甲基化在 ERCC6 表达中的作用。结果显示，LECs和ARCs晶状体皮质中ERCC6的mRNA和蛋白水平显着降低。ARC 的 LEC 中 DNMT3b mRNA 显着高于对照组。在ARC组中，与对照组相比，LECs中ERCC6启动子区域的CpG岛表现出高甲基化。用 5-aza-dC 处理后，HLE B-3 中的 ERCC6 蛋白水平增加。我们得出的结论是，晶状体中 DNMT3b 的过度表达与 ERCC6 CpG 岛的高甲基化有关，这与 ARC 患者 LEC 中 ERCC6 表达的减少有关。