细胞科学与治疗杂志
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应用缺氧建立肾细胞癌细胞系上皮-间质转化模型

洪保安、周昌华、杜鑫、陈思琪、邓晓虎、沙依热木多尔坤、李庆、杨勇、龚侃、张宁

目的：通过CoCl2诱导缺氧建立肾细胞癌细胞株上皮间质转化（EMT）模型。
材料与方法：实验采用肾细胞癌细胞系A498和786-O，采用CoCl2模拟缺氧。用不同浓度的 CoCl2 培养癌细胞。检测形态和细胞活性变化以获得模拟缺氧的最佳 CoCl2 浓度。CoCl2处理后的细胞进行Western blot分析，检测HIF-1α的表达以及EMT相关分子（E-cadherin、纤连蛋白）的变化。
结果：与对照组相比，CoCl2 处理组的细胞连接松散且分散。低剂量时CoCl2对A498细胞活力的影响并不明显，但当CoCl2浓度达到250 mM时，细胞活力逐渐下降。相反，CoCl2在50mM-200mM范围内诱导786-O细胞增殖，但在高于200mM的剂量时抑制细胞生长。与常氧条件相比，CoCl2模拟缺氧条件下，A498和786-O细胞系中E-cadherin表达显着下调，纤连蛋白表达上调（P<0.01）。
结论：通过CoCl2诱导缺氧成功建立肾细胞癌细胞株EMT模型。该模型将帮助我们进一步研究EMT机制并探索抑制肿瘤侵袭和转移的新治疗靶点。