细胞与发育生物学
开放获取

抽象的

Cflarb 补充了 Cflara 的功能，使 Cflara 能够敲除斑马鱼的正常发育

Se Jong Huh、Kyu-Seok Hwang、Sushruta Koppula、Chul Geun Kim、Cheol-Hee Kim、Chan Gil Kim1

细胞 FLICE 抑制蛋白 (cFLIP、cflara) 是死亡受体 (DR) 诱导的细胞凋亡和 NF-κB 激活的调节因子。已知 cFLIP 通过与 FADD/caspase-8 结合来防止 caspase 级联的激活。在许多肿瘤类型中已发现 cFLIP 上调，因此通过沉默 cFLIP 恢复细胞凋亡可能是癌症治疗中更有效的策略之一。斑马鱼 cFLIP 基因 cflara 具有 2 个死亡效应结构域 (DED) 和一个半胱天冬酶样结构域。通过RT-PCR和整体原位杂交检测斑马鱼胚胎中cflara的表达。为了研究 cflara 的体内功能，我们使用转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 生成了 cflara 敲除突变体斑马鱼。移码突变是由第一个 DED 结构域中的 10 bp 缺失引起的。通过近交F1代，产生了纯合突变鱼并通过PCR确认。敲除 cflara 会导致小鼠心脏发育异常和胚胎死亡。然而，突变斑马鱼在心率、存活率或发育方面与野生型斑马鱼没有表现出任何差异。斑马鱼有 cflara 和 cflarb 的类似物。定量PCR显示突变斑马鱼的cflarb mRNA水平高于野生型斑马鱼。在化学暴露实验中，突变型斑马鱼幼虫在 CoCl2 处理后表现出比野生型更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。敲除 cflara 会导致小鼠心脏发育异常和胚胎死亡。然而，突变斑马鱼在心率、存活率或发育方面与野生型斑马鱼没有表现出任何差异。斑马鱼有 cflara 和 cflarb 的类似物。定量PCR显示突变斑马鱼的cflarb mRNA水平高于野生型斑马鱼。在化学暴露实验中，突变型斑马鱼幼虫在 CoCl2 处理后表现出比野生型更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。敲除 cflara 会导致小鼠心脏发育异常和胚胎死亡。然而，突变斑马鱼在心率、存活率或发育方面与野生型斑马鱼没有表现出任何差异。斑马鱼有 cflara 和 cflarb 的类似物。定量PCR显示突变斑马鱼的cflarb mRNA水平高于野生型斑马鱼。在化学暴露实验中，突变型斑马鱼幼虫在 CoCl2 处理后表现出比野生型更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。突变斑马鱼在心率、存活率或发育方面与野生型斑马鱼没有任何差异。斑马鱼有 cflara 和 cflarb 的类似物。定量PCR显示突变斑马鱼的cflarb mRNA水平高于野生型斑马鱼。在化学暴露实验中，突变型斑马鱼幼虫在 CoCl2 处理后表现出比野生型更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。突变斑马鱼在心率、存活率或发育方面与野生型斑马鱼没有任何差异。斑马鱼有 cflara 和 cflarb 的类似物。定量PCR显示突变斑马鱼的cflarb mRNA水平高于野生型斑马鱼。在化学暴露实验中，突变型斑马鱼幼虫在 CoCl2 处理后表现出比野生型更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。CoCl2处理后，突变斑马鱼幼虫与野生型相比表现出更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。CoCl2处理后，突变斑马鱼幼虫与野生型相比表现出更长的存活率。然而，与顺铂治疗没有观察到显着差异。该数据表明 cflarb 可能有助于正常发育并导致化学耐受性的差异。