真菌基因组学与生物学
开放获取

抽象的

来自致病疫霉的 Glucokinase-1 的表征：一种多功能酶

利亚拉·维拉洛博斯-皮纳、赫尔墨斯·巴尔扎、赫克托·阿科斯塔、迭戈·安德拉德-阿尔维亚雷斯、阿斯卡尼奥·罗哈斯、路易莎娜·阿维兰、阿玛兰塔·戈麦斯-阿雷亚萨

致病疫霉有 7 个编码葡萄糖激酶的基因，其中 [PITG_06016] ( PiGlcK-1)基因在不同生长阶段表达量最高。然而，其在致病疫霉代谢中的作用仍不清楚。在这项研究中，我们克隆、过表达、纯化了这种酶并对其进行了生化表征。纯化的重组蛋白对葡萄糖和 ATP 的 Km 分别为 0.66 mM 和 2.2 mM。PiGlcK-1使用 ADP 和焦磷酸 (PPi) 作为磷酰基供体，能够磷酸化果糖，尽管相对于葡萄糖而言只有 48%。这些分子的效率分别比 ATP 低 50% 和 11%。此外，当磷酰基供体为ATP或ADP时，PiGlcK-1可被PPi激活，其活性分别增加3.6或2.5倍。PiGlcK-1 可以形成寡聚复合物，这些复合物往往会自发解离，其中单体具有最高的活性。这种寡聚可以被二硫苏糖醇破坏，从而使 PiGlcK-1 活性增加两倍。这些结果表明PiGlcK-1是一种多功能酶，在感染第一阶段以及坏死营养阶段可在利用可用糖方面发挥重要作用，并提出针对可能的氧化应激条件的可能调节机制。