分枝杆菌病
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基于 Rv1980c 破坏 Rv3019c 序列的融合蛋白的克隆、表达和表征及其在肺结核血清中潜在免疫反应性的评估

伊莎贝拉·伽马·萨德拉、安娜·卡拉·德·保罗·穆里纳里、莱拉·德·苏扎·丰塞卡和玛丽亚·海伦娜·费雷斯·萨阿德

结核分枝杆菌特异性抗原 (Ag) 在开发结核病 (TB) 免疫诊断测试中具有重要价值，然而人类对 Ag 表位的异质识别可能会导致测试的特异性变化。在这项工作中，我们描述了基于来自 MPT-64 的两种肽破坏 MT-10 Ag，F1-MT10.3 (1M-40S):CE15 (173G-187A):MT10.3 (41S) 的两种融合蛋白的构建-96) 和 F2- MT10.3 (1M-40S):MPT64 (91L-205A):MT10.3 (41S-96)，以及它们在结核血清中的潜在免疫反应性。将这些融合基因克隆到表达载体中，插入大肠杆菌中，表达并纯化其蛋白。使用 ELISA 技术对纯化的融合蛋白和单一完整抗原进行 IgA 评估，诊断为肺结核 (TB) 的个体和患有其他肺部疾病的对照者血清中的 IgM 和 IgG。与单个完整蛋白质相比，F1 构建产生了新的肽，F2 产生了两个修饰的肽。对结核病人血清进行测试，该结构被所有抗体类型识别，但 ELISA-IgA 获得了最好的结果，它主要识别 F2 (66.7%) 和 F1 (58.3%)，其次是完整的单一抗原 MT10.3 ( 41.7%）和 MPT64（16.7%）保持最高特异性（95.5%），迄今为止未被注意到。IgG-F1 和 IgM-F2 的反应性显示出比完整 MT10.2 和 MPT64 更高的 UAC。数据证明了结构的可行性以及分子修饰对于获得潜在的免疫反应性改善的有用性，