病毒学与真菌学
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使用 WH211 和 WH303 单克隆抗体检测猪瘟病毒 GPE 株的表面等离子共振生物传感器测量与蛋白质印迹测定的比较

Nor Hidayah Mustafa、Zeenathul Nazariah Allaudin、Parisa Honari、Ooi Peck Toung 和 Mohd-Azmi Mohd-Lila

单克隆抗体 WH211 和 WH303 在常规实验室中用于检测猪瘟病毒 (CSFV) 或其主要包膜 E2 蛋白。虽然 E2 被认为是最具免疫原性的蛋白质，但它也是变化最大的，并且通常不能被针对该蛋白质的特异性单克隆抗体识别。本研究的目的是通过表面等离子共振生物传感器和蛋白质印迹测定这两种众所周知的测定法来比较 WH211 和 WH303 抗体对 CSFV GPE 株的检测灵敏度。已知在不同识别位点（表位）检测CSFV E2基因（gp55）的WH211和WH303抗体均被用作检测GPE-毒株（分析物）的配体。在 SPR 测定中，GPE− 菌株在最高稀释度 1:1000 (v/v) 下显示出与单克隆抗体的相互作用。在最低稀释度 (1:10) 下，GPE− 菌株与固定化单克隆抗体 WH211 的相互作用比与单克隆抗体 WH303 的相互作用 (60.0 RU) 增加两倍以上 (163.5 RU)。这项研究记录了 WH211 作为 CSFV E2 基因靶标的强烈偏好，因为它对 GPE− 菌株具有较高的敏感性，但亲和力较低。与 WH211 相比，当用研究稀释度的 WH303 印迹时，发现 GPE− 菌株的 E2 表位无法检测到。研究结果表明，与 Western Blot 相比，SPR 检测灵敏度高 2500 倍，并且 Western Blot 对 GPE− 菌株的检测限无法达到单克隆抗体稀释度超过 1:10 的程度。因此，SPR方法可以克服GPE−疫苗株无法识别的风险。虽然，