临床化学与实验室医学杂志

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人血液中胎球蛋白 A 磷酸化和其他分子修饰的检测和表征

马凯塔·科瓦奥娃、休伯特·卡尔巴赫、安德烈亚斯·彼得、汉斯·乌尔里希·哈林、诺伯特·斯特凡、安德烈亚斯·比肯菲尔德、欧文·施莱歇尔、康斯坦丁诺斯·坎塔齐斯

目的:肝因子胎球蛋白 A (Fet A) 与多种病理状态有关,如胰岛素抵抗、2 型糖尿病、大血管疾病以及全身异位和血管钙化。Fet A 也可能在肿瘤生长和转移中发挥作用。Fet A 的生物活性可能受到各种修饰的影响,包括磷酸化、O-和 N-糖基化以及脂肪酸结合。 方法:我们开发了一种基于抗体的测定法,用于检测丝氨酸 312 处磷酸化的 Fet A。通过气相色谱法测定脂肪酸模式。 结果:使用该抗体,我们发现磷酸化在人血浆或血清中在室温下稳定8小时。我们观察到,Fet A 在人血浆中以多种糖基化形式存在,但 Ser 312 磷酸化程度与糖基化无关。OGTT(0-120 分钟)期间磷酸化模式没有变化。我们进一步发现,人 Fet A 优先结合饱和脂肪酸 (>90%),但会牺牲单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。 结论:我们的结果表明,人血浆中存在不同的 Fet A 分子种类,这些不同的修饰可能决定了 Fet A 的不同生物学效应。
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