色谱与分离技术杂志
开放获取

抽象的

用于测定小体积人血浆中替诺福韦的高效液相色谱串联质谱 (HPLC-MS/MS) 方法的开发和验证

Mulubwa M、Rheeders M、Du Plessis L、Grobler A 和 Viljoen M

在临床环境中，最需要的是在短时间内测定小血浆量中的血浆替诺福韦 (TFV) 浓度。开发并验证了HPLC -MS /MS 方法用于 TFV 的测定。通过蛋白质沉淀提取 10 μL 血浆样品体积。用作内标 (ISTD) 的西咪替丁和 TFV 在带有预柱的 C18 (Phenomenex Kinetex TM 30 mm × 2.1 mm, 2.6 μm) 反相柱上进行分离。梯度流动相由 10 mmol/L 乙酸铵水溶液和乙腈/甲醇（50:50，v/v）组成。TFV 和 ISTD保留时间分别为 0.27 和 0.90 分钟，运行时间为 2 分钟。在正电离模式下监测母体到 TFV (m/z 288.072→176.038) 和 ISTD (m/z 253.13→158.987) 子离子的转变。TFV 浓度范围为 12.5-600 ng/mL 时，校准曲线呈线性（平均 r2，0.9958）。平均回收率为 96.9%。三个质量控制的准确度、测定间和测定内以及定量下限 (12.5 ng/mL) 均在 <15% 相对标准误差的可接受限度内。TFV 在研究条件下稳定，未观察到基质效应或显着残留。开发并验证了一种独特、可靠且稳健的方法，用于测定小体积 (10 μL)人血浆中的 TFV并纳入测定 30 名接受抗逆转录病毒治疗的 HIV 感染女性的血浆 TFV 水平。