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抽象的

外环AMP独立蛋白激酶-L型钙通道和山羊附睾精子前向运动的有效调节剂

黛贾尼·纳斯和米通·肖

目的：山羊 (Capra indicus) 精子的膜表面具有一种新型的 ecto-cAMP 独立蛋白激酶 (ecto-CIK)。这种酶在附睾精子的成熟过程中表现出显着的变化。我们研究了 CIK 通过控制细胞内 [Ca2+] 水平在调节附睾精子向前运动中的作用。
方法：用 CIK 抗体处理尾部附睾成熟精子细胞，在暴露 120 分钟时观察到酶活性最大抑制 (85%)。为了分析钙吸收机制，细胞在用 CIK 抗体处理并用不同的钙通道调节剂预处理后暴露于 45Ca2+。使用fura 2-AM 荧光测定细胞内[Ca2+]i 信号。使用计算机分光光度测定法来测量向前运动的百分比。
结果：结果表明，通过质膜 L 型电压依赖性 Ca2+ 通道对钙的吸收受到 CIK 的调节。用瓦拉帕米 (20 μM)、硝苯地平 (20 μM) 预处理精子细胞可显着抑制 CIK 抗体诱导的细胞内 [Ca2+]i 增加。而钙调蛋白拮抗剂三氟拉嗪和 w13 (N-(4-氨基丁基)-5-氯-2 萘磺酰胺盐酸盐和叠氮化钠（一种有效的线粒体抑制剂）对此钙进入没有影响。用 CIK 抗体的钙离子载体 A123187 进行治疗细胞表现出对通道抑制剂不敏感的钙摄取增加。据观察，维拉帕米 (20 μM) 对 CIK 抗体处理的精子的前向运动降低 (~50%) 具有显着作用。结论
：我们得出的结论是，CIK 是附睾精子向前运动的重要调节剂，并且该调节可能部分由细胞内 [Ca2+]i 水平激活，其程度由电压门控 L 型钙通道功能性赋予。