遗传综合征与基因治疗杂志
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通过EGFR启动子控制的重组DNASE1、DNASE1L3、DNASE2和DFFB转基因表达根除人类卵巢癌细胞：癌症靶向治疗的新策略？

马雷克·马莱基、杰西卡·达尔克、梅丽莎·黑格、林恩·沃尔文德和拉夫·马莱基

简介： 卵巢癌是所有妇科癌症中死亡率最高的。接受晚期卵巢癌全身治疗的患者会遭受可怕的副作用。癌症幸存者及其后代遭受全身治疗的医源性后果：基因突变。我们工作的最终目标是开发疗法，选择性地完全消除癌细胞，但不伤害健康细胞。实现这一目标的一个重要考虑因素是卵巢癌细胞过度表达 EGFR 或其突变体，这成为区分它们与健康细胞的因素 - 个性化治疗的潜在促进因素。

具体目标：该项目有三个具体目标：（1）对EGFRvIII和EGFR合成抗体引导的自杀基因携带载体进行生物工程改造；(2) 对由 EGFR 启动子控制的人类重组 DNASE1、DNASE1L3、DNASE2 和 DFFB 进行基因工程 DNA 构建体；(3)通过转基因表达的重组DNA酶的核内靶向选择性地根除卵巢癌细胞。

方法：从人类文库中选择 EGFR 和 EGFRvIII 的合成抗体，并用于生物工程生物标签引导的转基因载体。由 EGFR 启动子控制的人 DNASE1、DNASE1L3、DNASE2、DFFB 的编码序列从人 cDNA 中扩增，并通过基因工程改造到也编码与 NLS 和 GFP 融合的质粒构建体中。携带DNA酶转基因的载体在体外从腹水和培养物递送至人卵巢癌细胞中。

结果：合成抗体引导载体将重组 DNA 酶的转基因有效递送至卵巢癌细胞中。这些细胞中 DNA 酶的转基因表达和核靶向导致其基因组遭到破坏并导致其死亡，这一点通过分子死亡标签的标记得到验证。在没有过度表达 EGFR 的健康细胞中，没有记录到任何变化。

结论：重组DNASE1、DNASE1L3、DNASE2、DFFB在体外在卵巢癌中的靶向表达导致其完全根除，但对健康细胞没有影响。这种新颖的治疗策略有可能将其简化为体内试验，作为卵巢癌和其他癌症的个性化靶向治疗。