国际标准期刊号: 2165-8048
程鑫、杨波、刘东、何娟、陈甘、陈勇、黄发和江Y盛
将尿酸氧化酶基因克隆到保加利亚乳杆菌中,产生尿酸氧化酶,分解尿酸,治疗高尿酸血症。利用GenBank上的产朊假丝酵母尿酸氧化酶基因序列(uricase,E12709),将PCR扩增的尿酸氧化酶基因片段插入质粒pMG36e中,构建重组质粒PMG36e-U,然后电转化保加利亚乳杆菌。我们使用 SDS-PAGE 来鉴定基因工程细菌细胞裂解物中的尿酸氧化酶并测量尿酸氧化酶活性。从产朊假丝酵母基因组中通过 PCR 扩增尿酸氧化酶基因。含有尿酸氧化酶基因的重组质粒PMG36e-U成功电转化保加利亚乳杆菌。SDS-PAGE显示该基因工程菌合成的尿酸氧化酶亚基的分子量约为34 KD,菌制剂的体外酶活性高达0.33 u/mL。结论:将尿酸氧化酶基因克隆到保加利亚乳杆菌中,并成功分解尿酸。