国际标准期刊号: 2329-6917
高亚、徐英、宋杰、洪家琼、卓伟斌、杨春燕、张宇、范志平、郭彦武、岳春燕、孙海涛、平宝红
目的:人骨髓间充质干细胞(hBMSC)已用于预防和治疗造血干细胞移植后患者的急性移植物抗宿主病(aGVHD)。本研究比较了人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)和hBMSCs的生物学特性和免疫抑制活性,为hAMSCs潜在用于治疗aGVHD提供实验证据,从而解决hBMSCs来源不足的问题。方法:采用酶消化法分离HAMSCs。使用Ficoll-Hypaque密度梯度分离hBMSC。通过形态学分析、细胞生长分析、细胞周期分析、免疫表型分析和免疫荧光测定来比较两种干细胞类型的生物学特征。对 MSC 和外周血单核细胞 (PBMC) 进行体外共培养,并使用 Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 测定法测量淋巴细胞增殖。使用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 测定共培养上清液中的 IFN-γ 产量。结果:hAMSCs和hBMSCs均具有成纤维细胞样形态。hAMSCs 可以维持至少 15 代培养,但 hBMSCs 在第 6-7 代时开始表现出衰老迹象,增殖能力显着下降。hAMSCs与hBMSCs的G2/M期细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。免疫表型分析显示hAMSC和hBMSC表面CD105、CD90和CD73阳性表达,CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR阴性表达。hAMSC 对 Oct-3/4 呈阳性,但 hBMSC 则不然。hAMSC 和 hBMSC 均表达波形蛋白。hAMSC 和 hBMSC 抑制 PHA 刺激的 PBMC 增殖。随着 MSC 比例的增加,这种抑制作用更强。两种MSCs对PBMCs增殖的抑制作用差异无统计学意义(P>0.05)。当PBMCs与hAMSCs或hBMSCs共培养时,干扰素-γ(IFN-γ)产量低于单独培养时(P<0.05)。PBMCs与hAMSCs共培养时的IFN-γ产量低于与hBMSCs共培养时的IFN-γ产量(P>0.05)。结论:本研究结果表明,hAMSCs比hBMSCs具有更高的增殖活性和更清晰的干细胞特性。