克隆与转基因
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花生中肌醇四磷酸 1-激酶 ( AhITPK1 ) 和肌醇 1,4,5-三磷酸激酶 ( AhIPK2 ) 基因的分离和鉴定

Ajay BC、Bera SK、Devaiah K、James O、Violetka T 和 Anthony A

在当前的研究中，使用 RT-PCR 从胚胎中分离出肌醇四磷酸 1-激酶 (ITPK1) 和肌醇 1,4,5-三磷酸激酶/肌醇多磷酸多激酶 (IPK2) 的部分 cDNA 克隆，并命名为 AhITPK1 和 AhIPK2 亚型的基因。AhITPK1和AhIPK2基因的部分cDNA序列分别具有1146和891bp的开放阅读框(ORF)，与其他植物基因具有高度相似性。AhITPK1与Aradu具有高度同源性。花生的Q95MC具有单个外显子，没有内含子，属于ATP-grasp蛋白家族。AhIPK2 与 A. duranensis 的 Aradu.24V9G 具有高度相似性，并包含三个外显子，两侧各有 5' 和 3' UTR。与其他IPK2基因不同，AhIPK2具有保守结构域，例如PxxxDxKxG和[L/M][I/V]D[F/L][A/G][H/K]。系统发育分析将 AhITPK1 与 A. duranensis、A. ipinensis 和 Oryza brachyantha 归为一类，而 AhIPK2 与 Cucumis melo 和 C. sativus 归为一类。从进化角度来看，AhITPK1 和 AhIPK2 在遗传上与其他植物属不同。此外，实时PCR分析显示AhITPK1和AhIPK2基因在花生胚和花蕾中高表达。首次鉴定了花生中属于植酸途径的 AhITPK1 (KR778986) 和 AhIPK2 (KR778988) 基因，并表征了这两种亚型在不同组织中的表达模式。人们发现这些基因在花蕾和胚胎中含量丰富。结果表明，胚胎发育显着影响花生中两种 AhIPK 亚型的表达。在进化上，它们被发现与其亲本物种不同。这项研究是了解这两种 AhIPK 亚型在植酸合成中的作用的重要一步。然而，未来涉及基于 RNAi 的功能表征的研究有必要建立它们与花生胚胎发育的联系。