克隆与转基因
开放获取

抽象的

用于利用体细胞核移植克隆猪的原代成纤维细胞系中的多能细胞类型

Sharon J. Harrison、Luke FS Beebe、Ivan Vassiliev、Stephen M. McIlfatrick 和 Mark B. Nottle

我们之前已经证明，与从同一动物获得的成体成纤维细胞相比，使用从骨髓中分离的猪间充质干细胞（MSC）可以增加发育至囊胚阶段的体细胞核移植（SCNT）胚胎的比例。本研究的目的是确定间充质干细胞是否也存在于常用于克隆活体动物的成体成纤维细胞的原代培养物中。为此，我们选择了之前用于克隆猪的成体成纤维细胞的原代培养物。使用低密度平板分离单细胞克隆。培养 7 天后，63% 的集落表现出典型的成纤维细胞形态，而其余的则呈现鹅卵石状外观。显示成纤维细胞形态的 57 个克隆中有两个分化为脂肪细胞，但未分化为软骨细胞或骨细胞（单能克隆）。33 个鹅卵石样克隆中的 3 个仅分化为软骨细胞，而 3 个则分化为脂肪细胞和软骨细胞，但不分化为骨细胞（双能克隆）。然后将其中一个双能鹅卵石样克隆用于 SCNT 和体外发育，与不分化的成纤维细胞样克隆进行比较。两种细胞类型产生囊胚的速度相似。总之，我们在先前用于克隆活仔猪的成体成纤维细胞的原代培养物中鉴定出了单能和双能细胞类型。而3则分化为脂肪细胞和软骨细胞，但不分化为骨细胞（双能克隆）。然后将其中一个双能鹅卵石样克隆用于 SCNT 和体外发育，与不分化的成纤维细胞样克隆进行比较。两种细胞类型产生囊胚的速度相似。总之，我们在先前用于克隆活仔猪的成体成纤维细胞的原代培养物中鉴定出了单能和双能细胞类型。而3则分化为脂肪细胞和软骨细胞，但不分化为骨细胞（双能克隆）。然后将其中一个双能鹅卵石样克隆用于 SCNT 和体外发育，与不分化的成纤维细胞样克隆进行比较。两种细胞类型产生囊胚的速度相似。总之，我们在先前用于克隆活仔猪的成体成纤维细胞的原代培养物中鉴定出了单能和双能细胞类型。