抗病毒与抗逆转录病毒杂志
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HBV 聚合酶中的新型 rtM204 突变导致对阿德福韦和替诺福韦的敏感性降低

张科、克里斯蒂安·巴赫、玛丽亚·诺伊曼-弗劳恩、夏雨辰、巴斯蒂安·贝格尔、罗尔夫·凯撒、维雷娜·希尔根、安德里亚·克莱默、奥利弗·希尔根和乌尔里克·普罗泽

背景：慢性 HBV 感染的治疗受到耐药性选择的限制。HBV 逆转录酶 YMDD 基序中的 rtM204I/V 突变是有据可查的拉米夫定和恩替卡韦耐药决定因素，但不是阿德福韦或替诺福韦耐药决定因素。后两种药物的系统表型数据有限。

方法：在 CMV 启动子的控制下，将 rtM204 突变 (rtM204A/I/K/L/Q/S/T/V) 系统地引入具有复制能力的 1.1 倍 HBV 超长构建体中。标准化瞬时转染后通过选择性 qPCR 测定病毒复制适应性。通过使用标准化高通量表型测定确定拉米维顿、恩替卡韦、阿德福韦和替诺福韦的 IC50 值来评估体外药物敏感性。通过HepaRG细胞的感染来分析感染性。

结果：体外表型分析显示 rtM204K 赋予阿德福韦和替诺福韦高水平耐药性，但同时损害复制能力。如 rtM204I/V 中所述，rtL180M 或 rtL80I 无法恢复其适应性。rtM204L 和 rtM204Q 使阿德福韦/替诺福韦的敏感性低水平降低，且不损失复制能力。rtM204A/I/S/T 显着降低了对任一药物的敏感性。有趣的是，单突变 rtM204V 显示出对两种药物的敏感性显着降低，但与补偿突变 rtL180M 结合后失去了耐药性。通过影响重叠的 S 基因，除 rtM204L 之外的 rtM204 突变体在 HepaRG 细胞中表现出感染性降低或减弱。

结论：我们建立了一种具有时间和成本效益的表型测定，并鉴定了新的 rtM204 突变，该突变赋予阿德福韦和替诺福韦体外交叉耐药性。尽管它们在病毒群体中的频率较低，但由于补偿性突变的潜在选择，它们的临床意义不应被低估，这可能会恢复病毒的适应性。