蛋白质组学与生物信息学杂志
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抽象的

P53 和 HIS 标签绑定

林赛·巴伦和亚历山大·JR·毕肖普

P53 是一种具有不同结构域的球状蛋白，是一种关键的肿瘤抑制因子，通过转录反式激活、抑制和蛋白质-蛋白质相互作用发挥作用。大量研究表明 p53 与多种具有多种已知功能的细胞蛋白之间存在蛋白质-蛋白质相互作用。由于这些相互作用以及许多基因表达调控，已经提出了多种潜在机制及其与肿瘤抑制的关系。需要在体外​​环境中测试这些相互作用，以证明任何已识别的相互作用是直接的。由于纯化重组全长 p53 存在困难，许多研究利用 p53 DNA 结合域来测试蛋白质与 p53 的直接相互作用。p53 的 DNA 结合结构域是结构化的，独立折叠并决定全长蛋白质的稳定性。因此，用这个分离的结构域进行体外实验是合理的。然而，我们证明，如果在测试与 p53 的相互作用时，相互作用的伴侣上存在 HIStag，这可能会导致检测到人工的蛋白质-蛋白质相互作用，从而增加假阳性结果的可能性。此外，HIS 标签的存在促进 p53 DNA 结合结构域的聚集和沉淀。这可能导致检测到人为的蛋白质-蛋白质相互作用，从而增加假阳性结果的可能性。此外，HIS 标签的存在促进 p53 DNA 结合结构域的聚集和沉淀。这可能导致检测到人为的蛋白质-蛋白质相互作用，从而增加假阳性结果的可能性。此外，HIS 标签的存在促进 p53 DNA 结合结构域的聚集和沉淀。