国际标准期刊号: 2456-3102
瓦迪姆·蒂梅尔巴耶夫、谢尔盖·多尔戈夫和塔季扬娜·米蒂奥奇金娜
尽管遗传植物类型数量的增加及其明显的经济实用性，但这种收益仍受到社会的认真认可，主要是因为来自遥远形式的外部遗传物质（微生物、感染等）的接近。）中断植物的目标品质声明以及作为抗毒素和除草剂保护的特殊标记。在这些条件下，人们对程序给予了独特的底层，通过这些程序，可以没有外部遗传物质（基本上是在初始起始点）并且在没有抗感染抵抗力的情况下会产生新的优质的产量类型，
由于消除标记生物的技术在最近十年中变得异常重要，因此，大多数研究都集中在新的创新和载体框架的改进上。在这项工作中，为了清除病人的DNA，我们利用了pMF载体共存的点显位式重组酶（Plant Research International，Wageningen，Netherlands）（Schaart 等，2004）。该框架的根本优势在于其连续的双重选择。农杆菌介导的改变后的第一阶段是利用抗氧化剂（如卡那霉素、潮霉素或磷酸三碱）测定再生剂，并进一步处理DNA分裂，无数完美的重组目的地（RS ）是由于重组酶R的混合起始而发生的限制，重组酶 R 在糖信号摄取的配体区 (LBD) 范围内失活。在地塞米松 (Dex) 的作用下培育植物组织后，其启动完成。进一步选择含有 5-f 细胞信号通路(5-FC)的细胞会阻断含有codA质量的植物组织的改善（细胞开关脱氨酶将无毒的5-FC转变为细胞毒性的5-氟尿开关）。
由于担心对地球和福祉造成危险，遗传变异植物中标记了特性的接近性，特别是抗氧化性，引起了公众的担忧。明确外部遗传物质（特别是细菌和病毒根）植物的形成的原理在这里，我们利用包含 Z. rouxii 重组酶 R 和 CodA-nptII 双功能选择性品质的 pMF 框架来生产无标记番茄和苹果植物，传递来自热带植物 Thaumatococcus danellii 的非常甜的索马甜 II 品质，从 E8 品质天然产物中提取出来广告商和 rbsS3A 去除器。我们使用了两种不同的重组酶。
早期选择必需愈伤组织并延迟对叶片植物的叶子或叶柄进行地塞米松处理，并进一步选择5-FC细胞。作为选择修改，我们通过仅传送索课马甜接合胶带的载体来改变植物，没有特定的标记。通过对所有获得的再生体进行PCR研究来选择适合这种情况的抽屉。我们已经获得了170个抽屉番茄品系，并已通过PCR进行了全部解剖。在接受重组酶运动后，仅获得了一种完全无标记的灌木番茄品系。比较结果是通过早期测定获得的。thaumatinII 胶带也直接改变了两种无标记植物。
我们还获得了三个免费的苹果蔬菜品系，这些品系已通过PCR进行了完全解剖，更新了T-DNA序列的接近程度。当时，我们使用延迟方法来选择无植物标记，其中一条检查线包含所有连接胶带。经过重组酶运动后，我们获得了30多个亚系，其中大部分失去了卡那霉素的保护。PCR和Southern涂片检查发现，RS目的地之间的所有不良质量和排列都重组过程消除，而完全收购的工厂中仍存在管理组件的热情质量。无论如何，通过半量PCR检测，我们可以区分大多数索马甜质量的表达，但并非所有都来自亚系。早期测定系统因为立即改变对于创建无标记苹果植物是无效的。pMF框架对于没有标记苹果或其他顽固收获的创建是合理的，因为顺基因番茄植物可以通过实际操作的直接改变来获得。该考试在一定编程中获得了俄罗斯科学基金会探索奖（编号14-50-00079）的资助。