国际标准期刊号: 0974-276X
内哈·加尔格、萨钦·庞迪尔、阿尼尔·普拉卡什和阿尼尔·库马尔
利用Primer3软件对冷诱导基因DREB1A进行引物设计。使用 Entrez 从 UniGene、GenBank 和 RefSeq 数据库中检索到 17 个与 DREB1A 基因相关的序列。通过多重序列比对,鉴定出 286 bp 的保守区域。使用Primer3 确定了保守区域和十七个核苷酸序列的潜在引物。使用 Premier Biosoft 的 NetPrimer 工具分析这些潜在引物的特性。最终确定了一种正向(5'端)和一种反向(3'端)引物,其GC含量为50%至60%,Tm为52至58℃,并且不存在二级结构。通过 BLAST 与 NCBI 的 nr 数据库进行局部比对来验证引物的特异性。所有比对均显示与 DREB1A 基因的显着比对,验证了引物的特异性。