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大鼠肝脏谷胱甘肽-S-转移酶的纯化和表征：四氯化碳和骆驼奶的作用

Mohamed Lebda、Nabil Taha、Saad Noeman、Mahdy Korshom、Abd El-Wahab Mandour 和 Ahlam El-Leboudy

谷胱甘肽-S-转移酶 (GST) 构成了一个多功能二聚体家族，主要是胞质生物转化酶，在保护组织免受氧化应激方面发挥着重要作用。他们催化细胞内谷胱甘肽与多种具有亲电子中心的化学物质的结合，最终的谷胱甘肽结合物具有增加的亲水性，有利于其进一步代谢和消除。我们的研究采用一步亲和层析法从大鼠肝脏中纯化 GST 酶，并研究四氯化碳的抑制作用和骆驼奶给药的改善作用。GST酶的纯化表明，GSH亲和滤液中的蛋白质浓度比粗提物降低，而比酶活性增加，表明单一纯化步骤切断了其他蛋白质并保留了GST酶的蛋白质。与对照相比，CCL4 降低了 GSH 和 CDNB 底物的 Vmax 并增加了 Km，表明 CCL4 可能是 GST 酶的非竞争性抑制剂，而骆驼奶增加了 GSH 和 CDNB 底物的 Vmax 并降低了 Km，表明骆驼奶增加了酶与底物的亲和力。两种基材。GST的活性随着底物浓度的增加而增加，直至达到最大活性，之后GST的活性形成平台期。关于温度对 GST 活性的影响，GST 活性在 25-35°C 之间观察到最大，超过 40°C 则失活。GST活性随pH逐渐升高而升高，直至pH值为7.1时达到最大活性，随pH升高而降低。我们的结论表明，CCL4 是 GST 酶的非竞争性抑制剂，而骆驼奶则增加了酶对其两种底物的活性和亲和力。