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抽象的

PRPF31中的R354X突变影响其炎症反应和剪接能力

肖小强* 邓方、黄少芬

前mRNA加工因子31（PRPF31）是RNA剪接的关键成分，也是色素性视网膜炎（RP）的致病基因。此前，我们发现PRPF31中的无义突变R354X在中国RP家族中诱导RP。为了研究该突变引起的RP发病机制的重要分子机制，我们使用HEK293T细胞生成了稳定表达R354X突变体、PRPF31野生型（WT）和相应空载体的细胞系，所得细胞系用于长非编码RNA测序（LncRNA测序）。LncRNA测序结果显示，与WT相比，R354X突变改变了编码和非编码转录本的表达和剪接。有趣的是，在 HEK293T 和 APRE-19 细胞中，炎症相关基因如 IFI6、OAS3 和 STAT3，WT PRPF31 过度表达导致其表达增强；然而，在R354X突变细胞中，这些基因的表达仍保持在基础水平。此外，在 HEK293T 中表达 R354X PRPF31 的细胞中发现 H2AFX 表达增加和生长能力减弱。与WT相比，R354X突变体在HEK293T中的二氢叶酸还原酶(DHFR)上表现出不同的剪接模型。在IP分析过程中，我们发现R354X突变体减少了其与ARPE-19细胞中CPSF1和SORBS1 mRNA的结合，并且在ARPE-19细胞中其与CTNNBL1的结合也受到干扰。另一方面，R354X突变体也提高了转录本通读的水平。总而言之，PRPF31 中的 R354X 突变影响细胞存活，改变基因的表达和剪接。