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活性蓝色染料：人类精子液泡的亮点

金子悟*、冈田由纪、横田聪、高松清

目的：世界卫生组织男科学参考手册将精子头部的轮廓视为评估男性不育的关键参数，并将内部液泡归类为头部缺陷。液泡的特征在个体间以及精子间是异质的。本研究报告了活性蓝 2 (RB2) 的一些独特特性。该染料对人类精子和精子细胞表现出 pH 依赖性细胞特异性。

材料和方法：人精子和精子细胞在 pH 10.0 下用 RB2 染色。

结果： RB2对人精子和精细胞进行染色，呈半透明蓝色小体，但对淋巴细胞不染色，而内液泡呈无色调斑点。RB2 染色还显示了退化的精子细胞，这些精子细胞已经经历了精原化，但在尾部伸长之前被阻止。大多数无精子精液标本（16/23 例）包括精子或退化的精子细胞。尽管个体间头部轮廓和空泡的特征存在异质性，但在 2.0 mmol/L 二硫苏糖醇存在下，RB2 染色普遍将轮廓重新形成椭圆形，并导致空泡消失，无论其原始特征如何。

结论：在pH 10 时，RB2 中的三个硫酸酯残基选择性地与鱼精蛋白中的Arg 中的胍基残基相互作用。细胞特异性是由于核蛋白的Arg 含量所致。RB2显露了精子的头部轮廓和内部液泡，并捕获了经过精原化的精子细胞。二硫键交联的局部失效可能在液泡形成中发挥关键作用。RB2 染色开辟了探索精子发生的新方法。