血液病与血栓栓塞疾病杂志
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5-氮杂胞苷恢复 PRG2 表达涉及 PKC-412 (Midostaurin) 耐药性 FLT3-ITD 阳性急性髓系白血病细胞的敏感性

Hamid Ali Nagi Al-jamal、Siti Asmaa Mat Jusoh、Mohamad Ros Sidek、Rosline Hassan 和 Muhammad Farid Johan

背景：抑癌基因 抑癌基因 (TSG) 在包括急性髓系白血病 (AML) 在内的多种癌症中因甲基化而失活。PRG2基因的转录沉默可能参与癌症的发生和进展。5-Azacytidine (5-Aza) 是一种 DNA 甲基转移酶抑制剂，可引起 DNA 去甲基化，从而导致沉默的 TSG 重新表达。Midostaurin (PKC412) 是一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可有效抑制 FLT3 酪氨酸激酶并诱导 AML 患者的血液学缓解。然而，临床试验中大多数 AML 患者对 PKC412 产生了耐药性。

方法：通过将 MV4-11 细胞过度暴露于 PKC-412 并用 5-Aza 处理来产生耐药细胞。分别使用膜联蛋白 V 和 MTS 测定法测定 PKC-412 的细胞凋亡和细胞毒性。使用微阵列进行基因表达谱分析，然后进行定量实时 PCR。使用蛋白质印迹法检查 STAT 活性，并使用焦磷酸测序分析研究 PRG2 的甲基化。

结果： PKC-412对耐药细胞的细胞毒性剂量显着高于亲代细胞和MV4-11Rpkc+5-Aza细胞（p=0.003）。与其他细胞相比，耐药细胞表现出显着更高的活力和更低的凋亡细胞（p<0.001）。与亲本细胞和耐药细胞相比，MV4-11R-pkc+5-Aza 细胞中 PRG2 的表达高出 300 倍以上 (p=0.001)。STAT3 在耐药细胞中被激活。MV4-11R-pkc+5-Aza 细胞中 PRG2 基因的甲基化显着降低。

结论： PRG2 表达的恢复会诱导对 PKC-412 的敏感性并增加细胞死亡。我们的研究结果表明，PRG2 基因可能在对 PKC-412 的敏感性中发挥作用，并可作为治疗对 PKC-412 酪氨酸激酶抑制剂耐药的 AML 患者的靶标。