解剖与生理学：当前研究
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PKCb 在类固醇激素刺激的钙挤出中 1,25D3-MARRS 受体 (ERp57/PDIA3) 信号转导中的作用

Sakara Tunsophon 和 Ilka Nemere

蛋白激酶 C (PKC) 参与鸡肠上皮细胞中 1,25(OH) 2 D 3 介导的钙快速排出。先前的报告表明 PKC a 和 PKC b 重新分布与钙挤出的剂量反应曲线相对应。我们通过在肠细胞原代培养物中使用 siRNA 研究了 PKC a 和 PKC b 在激素刺激的钙排出中的作用。结果表明，转染 PKC a 的 siRNA 的细胞中钙排出没有变化，而与相应激素相比，转染 PKC b 的 siRNA 显着降低了 1,25(OH) 2 D 3 处理的细胞中的钙排出。转染细胞和未转染细胞中处理的细胞（ P < 0.01）。使用 PKC a (safingol) 和 PKC b ([3-(1-(3-咪唑-1-基丙基)-1H-吲哚-3-基)-4-苯胺基-1H-吡咯的化学抑制剂也发现了类似的结果-2,5-二酮]）肠细胞悬浮液中。结果表明，与媒介物对照相比，PKC b 抑制了用 1,25(OH) 2 D 3 处理的肠细胞中钙的排出（导致钙摄取增加）（P < 0.001），而 PKC a 阻滞剂则没有表现出治疗组之间钙排出的任何差异。使用共聚焦显微镜，我们将激素暴露时间缩短至 30 秒，以便观察 PKC a 和 PKC b 的重新分布。将细胞暴露于 300 或 650 pM 1,25(OH) 2 D 3 30 秒后，发现 PKC a 的快速重新分布显着增加顶膜区域的荧光（分别为 P < 0.01 和 0.001）。相比之下，在细胞暴露于 300 pM ( P < 0.01) 或 650 pM ( P < 0.05) 环类固醇后，相对于对照组，PKC b 免疫荧光在细胞的基底外侧区域显着增加。结果表明，PKC a 是参与肠上皮细胞中1,25(OH) 2 D 3 介导的钙流出的PKC同种型。