质谱与纯化技术杂志
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红细胞分配和全血与血浆比率在生物分析中的作用：伐昔洛韦和阿昔洛韦的案例研究

阿拉宾达·萨哈、阿贾伊·库马尔、桑杰·贾格纳特·古鲁尔、阿尔沙德·库鲁和普拉蒂卡·斯里瓦斯塔瓦

开发了一种 LC-MS/MS 方法，用于同时测定人血浆中伐昔洛韦和阿昔洛韦的含量。采用固相萃取技术提取血浆样品，并使用 Inertsil CN-3 (5 μm) 柱和流动相（1 mM 醋酸铵缓冲液 - 甲醇，50:50 v/v）设置色谱条件。在多反应监测模式中，在质量转变 (m/z) 325.2→152.1、226.2→152.1、329.3→152.1 和 230.2→152.1 时，分别检测到伐昔洛韦、阿昔洛韦、伐昔洛韦 D4 和阿昔洛韦 D4 呈正极性。伐昔洛韦经验证的校准曲线范围为 4.09 至 725.63 ng/mL，阿昔洛韦经验证的校准曲线范围为 50.35 至 10017.29 ng/mL。在方法开发过程中，由于阿昔洛韦的 KWB/P 比值大于 1，而伐昔洛韦的 KWB/P 比值小于 1，因此无法在 2 小时内确定阿昔洛韦在全血中的稳定性。因此，研究了阿昔洛韦在全血中的药物分布和血浆。实验数据表明，由于红细胞对阿昔洛韦的细胞摄取，血浆中阿昔洛韦水平最初下降。因此，加标的比较样品可以达到平衡（红细胞和血浆之间）。达到平衡时间（30.0 分钟）后，从加标的全血中收获血浆并按照建议的方案进行处理。根据血液稳定性数据，我们得出结论，伐昔洛韦和阿昔洛韦在血液中均稳定2小时。