围手术期医学杂志
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使用桑格测序筛查 β-珠蛋白基因 (HBB) 中的罕见突变，包括血红蛋白 S D-Punjab

泽尚安萨尔

目的： β-地中海贫血是一种常染色体隐性遗传疾病，由于 HBB 基因中发现的多种不同突变导致异常血红蛋白的形成。这些突变使患者无法产生正确形式的血红蛋白。本研究的目的是通过对 HBB 编码、内含子和启动子进行测序，鉴定不包含在 ARMS PCR 常见突变组中的 β 地中海贫血患者中的 HBB 基因突变。

方法：对之前通过ARMS PCR通用检测检测HBB基因突变的总共10个样品（即IVS 1-1、IVS 1-5、密码子8/9、密码子41/42和619bp缺失）进行Sanger测序分析。两名健康受试者被纳入作为阴性对照。分离基因组DNA并扩增HBB基因。柱纯化的扩增产物用于双向循环测序（Big Dye Terminator，ABI，美国）。

 

结果：在本研究中，总共分析了 10 个样品。其中四名男性和六名女性。患者的平均年龄为三年。根据家族史、临床和实验室检查结果，所有患者均被诊断为重型β地中海贫血。平均而言，患者每两周接受一次输血。HBB基因检测到7种罕见突变，其中包括点突变。启动子区域的突变 HBB:c.138C>A (-88 C>A)、外显子 1 HBB:c.17_18delCT (Codon5 –CT)、HBB:c.47G>A (Codon15 G>A)、HBB： c.92G>C (Codon30 G>C)、HBB:c.50A>C (CAP+1 A>C)、外显子 2 HBB:c.118C>T (Codon39) 和内含子 2 HBB:c.315+1G>A (IVS II-IG>A)和密码子6处的杂合改变(GAG→GTG)以及密码子121处的杂合突变(GAA→CAA)。所有对照受试者均显示正常的 HBB 基因序列。此外，

结论：虽然ARMS PCR是检测HBB基因常见突变的一种快速、便捷的方法，但由于罕见突变，可能会漏掉一小部分患者，从而需要其他手段进行诊断。桑格测序是管理此类患者的一种准确而可靠的技术。