临床和细胞免疫学杂志
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STAT1 在 T/C28a2 永生化幼年人软骨细胞系中被组成型激活，并受到 IL-6 加可溶性 IL-6R 的刺激

埃文·C·梅萨罗斯和查尔斯·J·马勒穆德

采用 T/C28a2 永生化幼年人软骨细胞来确定信号转导子和转录激活子 1 (STAT1) 响应重组人白细胞介素 6 (rhIL-6) 或 rhIL-6 与可溶性 IL-6 受体 (sIL-6R)。通过 SDS-PAGE 和抗 STAT1 抗体的蛋白质印迹法鉴定了 STAT1 的两种形式：STAT1A 和 STAT1B。蛋白质印迹显示 STAT1 被组成型磷酸化 (p-STAT1)。尽管 T/C28a2 软骨细胞与 rhIL-6 (50 ng/ml) 一起孵育 30 分钟后 p-STAT1A 增加了 Δ=22.3%，但通过卡方分析，这一百分比差异未能达到显着性。类似地，在 30 分钟时未观察到 rhIL-6 (Δ=+10.7%) 对 p-STAT1B 的影响。相比之下，虽然rhIL-6加sIL-6R的组合对p-STAT1A没有影响，30 分钟后，与对照组相比，rhIL-6 加 sIL-6R 使 p-STAT1B 增加 Δ=73.3% (p<0.0001)，与单独使用 rhIL-6 相比，增加 Δ=56.7% (p<0.0001)。Janex-1 是一种 Janus 激酶 3 特异性抑制剂 (100 μM)，可部分降低 rhIL-6 对 p-STAT1B 的影响 Δ=27.7% (p<0.05)。本研究结果表明，STAT1A/STAT1B在T/C28a2软骨细胞中被组成性激活。尽管rhIL-6在小程度上增加了p-STAT1B，但与对照组或单独的rhIL-6相比，rhIL-6加sIL-6R的组合在刺激STAT1B磷酸化方面要有效得多。这些数据支持这样的可能性：虽然 T/C28a2 软骨细胞中 JAK3 介导的 STAT1 激活可能涉及 IL-6/IL-6R/gp130 途径，但这些结果表明响应 IL-6 的 STAT1 激活优先涉及 IL-6 反式-通过 sIL-6R 发送信号。