糖类组学与脂质组学杂志
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国际标准期刊号: 2153-0637
国际标准期刊号: 2153-0637
赛义德·凯瑟·沙阿
在本研究中，利福布汀二硫代氨基甲酸酯 (RFND) 使用三羰基技术用 Technetium-99m (99mTc) 进行标记。标记的 RFND 在放射化学纯度、盐水和血清中的稳定性、体外细菌结合、动物模型大鼠中的生物分布以及动物模型兔中的闪烁扫描准确性方面进行了进一步表征。最后将 99mTc(CO)3-RFND 的不同放射生物学特性与最近报道的 99mTc-RFN 进行了比较。据观察，二硫代氨基甲酸盐形式的 RFN 比最近报道的 99mTc-RFN 显示出更好的放射化学纯度、盐水稳定性、细菌结合、生物分布和靶向成像。这些更好的放射生物学参数使 99mTc(CO)3-RFND 成为更可靠的结核病成像试剂。上个世纪，科学家的主要成就之一是开发了疫苗和抗生素，在更大程度上消除或控制了大多数传染病。除了在传染病的诊断和治疗方面取得的巨大成就外，感染仍然是研究人员关注的焦点，甚至现在感染被认为是发病和死亡的主要原因。由于临床病理学的进步，传染病可以通过简单的实验室测试来检测并用适当的药物成功治疗。然而，据观察，导致死亡的感染的很大一部分可能是由于早期阶段难以检测到的情况造成的。在这种情况下及早及时发现有助于采取适当的治疗，从而降低死亡机会。核医学闪烁扫描技术 (NMST) 由于其更高的灵敏度，为疑似细菌感染的定位提供了不同的替代方案。深部组织感染、骨感染、需要早期适当治疗的急性危及生命的感染，如阑尾炎、因耐药而发生的严重慢性感染；以及免疫功能低下者的机会性感染，人们可以利用 NMST。诸如感染是否存在、其部位、严重程度和潜在原因等采石场可以通过使用 NMST 来回答。然而，要准确地回复这些猎物，先决条件是能够在感染部位积聚的可靠放射性药物。56但它不应具有毒性，在目标区域表现出较高的吸收性，低剂量，且成本低且易于获得。 除了正常的循环和排泄行为外，所报道的药物及其衍生物在其早期阶段就显示出有希望的特定目标（感染区域）与非目标（非感染区域）的比率。然而，结核分枝杆菌（MBT）等多重耐药细菌的出现 ，对临床医生及早发现和管理此类感染构成了严重威胁。在此方案中， 使用三羰基技术检查了99m Tc 的利福布汀二硫代氨基甲酸酯 (RFND) 标记。三羰基标记程序的可行性是基于 H 2 O 的 附着不良 99m Tc(OH 2 ) 3 (CO) 3 ] + 前体，易于取代。标记的 RFND 在放射化学纯度、盐水和血清中的稳定性、 体外 细菌结合、动物模型大鼠中的生物分布以及动物模型兔中的闪烁扫描准确性方面进行了进一步表征。最后将99m Tc(CO) 3 -RFND的不同放射生物学特性 与最近报道的 99m进行了比较Tc-RFN。利福布丁 (RFN) 购自中国成都宇阳高新技术开发有限公司，所有化学品和溶剂均购自 Sigma。在这项工作中，使用了Shimadzu的HPLC、Ludlum的井计数器、Capintech的剂量校准器和Nuclearmedizine的伽玛相机。使用先前报道的方法将利福布丁（RFN）衍生为利福布丁二硫代氨基甲酸酯（RFND）28。简而言之，将 0.002 mol RFND 和 2.4 mg NaOH 在干净的灭菌小瓶中混合。此后，将22ml四氢呋喃(THF)加入到反应瓶中，随后在冰浴中摇动30分钟。然后，2ml二硫化碳（CS2添加)并将反应瓶置于冰浴中持续摇动8小时。然后将混合物在室温下连续搅拌12小时，然后通过重结晶回收。RFND 的特点是先进的光谱技术。99mTc(CO)3-RFND 的合成及放射化学纯度 将 1 mCi (0.2 ml) 高锝酸钠与 2 mg (溶于 0.4 ml 生理盐水) RFND 混合，然后使用 0.1 mol/L HCL 调节 pH (pH 10)。充满干净氮气的灭菌小瓶。此后，将混合物转移至 Isolink 试剂盒，然后在 25℃ 下孵育 15 分钟以获得最佳标记。采用高效液相色谱（HPLC）表征 99m Tc(CO) 3-根据先前报道的方法的放射化学纯度的RFND。简言之，将 10 µL 99m Tc(CO) 3 -RFND 注入配备有在 254 下运行的 UV 检测器、流动闪烁计数器、C-18 柱和二元泵的 HPLC 系统。此后，用水和甲醇(W:M)以1ml/min的流速洗脱柱15分钟。将流出物收集在单独的小瓶中，然后计算活性。结核分枝杆菌(MBT) 摄取 采用先前报道的方法评估99m Tc(CO) 3 -RFND 的MBT 摄取。简而言之，0.8 mL 乙酸 (0.01 M) 含有大约 1 x 10 8 MBT 的菌落形成单位 (CFU) 和 0.2 mL 磷酸钠缓冲液在 4 °C 下孵育 60 分钟。将混合物以 1500 rpm 离心 15 分钟，去除上清液后，悬浮于 1.5 mL 磷酸钠缓冲液中，重新离心。随后，再次除去上清液并对细菌沉淀进行活性计数。在健康和人工感染的动物模型大鼠中评估了99m Tc(CO) 3 -RFND 的 体内摄取百分比 。将动物分为两组，即 A 组和 B 组。对于 A 组动物，大约 1 x 10 8将 0.2 mL 盐水 MBT 中的菌落形成单位 (CFU) 肌肉注射到麻醉大鼠 Sprague-Dawley 大鼠（体重范围，200-250 g）的左腿中以产生感染。8小时后，将等摩尔量的无菌油注射至同一大鼠的右腿以产生炎症，随后静脉内给予0.5mCi 99m Tc (CO) 3 -RFND。对于B组动物，重复上述过程，但不施用MBT。此后，按照巴基斯坦核管理局（PNRA）、伦理委员会、巴基斯坦原子能委员会（PAEC）的程序，静脉注射放射性药物后，在不同的时间间隔处死大鼠。此后， 99m Tc(CO) 的 体内吸收百分比使用伽马计数器测量一克血液、脾、胃、肠、肾、感染肌肉、发炎和正常肌肉中的3 -RFND。用99mTc(CO)3-RFND成像健康兔子(体重：3.0至4.0kg)用于评估即用放射性药物的成像轮廓。将含有1×10 8 CFU的0.5mL MBT注射至健康兔子的左腿，08小时后，向同一兔子的右腿注射0.5mL无菌油。最后，将兔子面朝上放在伽马相机床上，然后静脉注射2 mCi 99m Tc(CO) 3 -RFND。使用低能量通用（LEGP）准直器以不同的时间间隔采集全身图像。