遗传综合征与基因治疗杂志
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抽象的

使用反义寡核苷酸靶向抑制肌营养不良蛋白假外显子

Barrett LW、Fletcher S、Barreo RA、Bellgard MI、Flanigan KM、Wong B 和 Wilton SD

反义寡核苷酸诱导的外显子跳跃作为恢复杜氏肌营养不良症功能性肌营养不良蛋白表达的潜在疗法显示出巨大的前景。重定向 mRNA 加工可以切除移码缺失或重复侧翼的一个或多个外显子，从而恢复阅读框并诱导贝克型肌营养不良症样转录物。在这里，我们报告了应用外显子跳跃从成熟肌营养不良蛋白 mRNA 中切除致病的 72 bp 假外显子。该假外显子源自内含子 47 中的单个 T>G 碱基变化，该变化创建了具有强一致剪接位点评分的受体位点。虽然在框架内，但该伪外显子包含几个终止密码子，并且其包含内容与杜氏肌营养不良症的诊断一致。这位 21 岁的患者不再能行走，但可以在没有帮助的情况下站立和坐下，表明前 mRNA 处理的渗漏和一些正常转录本的生成在一定程度上延缓了肌肉萎缩。在 DMD 损伤激活一个或多个隐性剪接位点并导致成熟 mRNA 中内含子序列保留的情况下，外显子跳跃有可能产生正常的基因转录本。靶向突变剪接位点的反义寡核苷酸能够从成熟转录物中去除假外显子并恢复全长肌营养不良蛋白表达。这与大多数针对杜氏肌营养不良症的外显子跳跃策略形成鲜明对比，其中使用反义寡核苷酸来恢复表达，但诱导的贝克尔肌营养不良症样转录物比全长 mRNA 更短且功能可能较差。因此，假外显子可能特别容易外显子跳跃，特别是当基础表达水平提高了内源性肌营养不良蛋白水平时，降低了疾病的严重程度，并且应该减轻对诱导的正常亚型的免疫反应。