细胞科学与治疗杂志
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OCT-3/4 和 KLF-4 的 TATκ 融合蛋白：能够将融合蛋白递送至靶细胞的稳定混合群细胞系

法兹丽娜·诺丁、Gee Jun Tye、Joop Gaken 和 Farzin Farzaneh

越来越多的证据表明，一小部分基因（包括 Oct-3/4、KLF4、Sox2 和 c-Myc）的强制表达可以诱导先前分化的细胞重新编程，从而产生诱导多能干细胞 (iPSC) ）。然而，通过基因修饰产生 iPSC 会增加恶性转化的风险。因此，非常需要在没有不可逆遗传修饰的情况下对分化细胞进行有效的体外重编程。改进的转录κ反式激活因子（TATκ）是一种合成的TAT-HIV，能够将多种蛋白质递送到靶细胞中，从而使其成为转录因子或治疗药物的潜在替代递送机制。使用绿色荧光蛋白（GFP）和Apoptin作为模型蛋白，我们最近描述了一种生成细胞系的策略，该细胞系可分泌携带修饰的 HIV-TAT 蛋白转导结构域 (PTD) 的蛋白质，以便随后由靶细胞介导的蛋白质转导介导的摄取。使用这种策略，我们生成了分泌与 TATκ 融合的多能因子 Oct-3/4 或 KLF4 的 293T 细胞。在转导的293T细胞的培养基中检测到Oct-3/4和KLF4，并且通过Western印迹分析证实了造血细胞系JURKAT和FDCP-1对Oct-3/4的摄取。KLF4 存在于生产者 293T 细胞的培养基中，但我们仍然无法证明靶细胞的摄取。根据获得的结果，我们希望这些稳定的混合群体细胞系能够在用于治疗目的的 iPSC 生成中发挥重要作用。