临床毒理学杂志
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低剂量DMSO鞘内注射用于小鼠冷冻保存人星形胶质细胞的毒性研究

Tehila Sonnenfeld*、Einat Rauchbach*、Rotem Downey*、Daniel Blumenkrants、Arik Hasson、Graciela Kuperstein、Noam Kronfeld、Raanan Margalit、Kfir Molakandov、Vered Morad、Abraham Nyska、Shalom Guy Slutsky、Michel Revel、Michal Izrael*

背景： AstroRx ^®是一种同种异体细胞疗法，由源自多能胚胎干细胞的健康且功能齐全的人类星形胶质细胞组成。在早期 I/IIa 期临床试验中，对鞘内注射新鲜配方的 AstroRx ^®细胞治疗肌萎缩侧索硬化症 (ALS) 进行了评估。这项研究的结果表明，这种治疗方法是安全的，并显示出在减缓 ALS 进展方面具有临床益处的信号。由于与新鲜细胞产品的制造和分销相关的后勤挑战，以及为了在细胞给药前完成安全和质量控制测试，开发了一种冷冻保存的 AstroRx ^{®配方。冷冻保存的 AstroRx ®}产品含有 3.5% DMSO 作为冷冻保护剂。在临床现场解冻后，冷冻保存的产品在使用前要稀释至浓度为 0.23% DMSO。

目的：评估将含有 DMSO 的冷冻保存 AstroRx ^®与新鲜 AstroRx ^®注射到小鼠体内后的毒性。

方法：对冷冻保存和新鲜 AstroRx ^®制剂进行体外兼容性评估，包括细胞活力、细胞数量、细胞身份、杂质、安全性和效力。此外，在免疫功能正常的癌症研究所 (ICR) 小鼠中使用两种浓度的 DMSO（0.25% 和 0.5%）对单独鞘内注射 DMSO 进行了神经毒性评估。在免疫缺陷的 NSG 小鼠中评估了含 DMSO 的冷冻保存 AstroRx ^®产品的神经毒性。

结果：体外可比性结果表明，新鲜 AstroRx ^® (n=13) 和冷冻保存的 AsrtroRx ^® (n=11) 细胞批次在所有测试参数中均相似。与对照组相比，鞘内注射浓度为 0.25% 或 0.5% 的 DMSO 后 7 天内，食物消耗、体重、临床症状以及神经运动和光束测试均无差异。同样，在 4 周的研究期间，向 NOD scid gamma 小鼠 (NSG) 单次鞘内注射解冻后用 DMSO 冷冻保存的 AstroRx ^®或新鲜 AstroRx ^®未引起神经系统体征或重大全身不良反应。通过 Alu 原位杂交证实，注射后 4 周，新鲜和冷冻保存的 AstroRx ^®细胞均存在。

结论：根据研究结果，鞘内注射含有 DMSO 配方的冷冻保存 AstroRx ^®细胞似乎不会对小鼠产生毒性作用。