临床和细胞免疫学杂志
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抽象的

p67phox 激活域中具有亚形突变的两个 CGD 家族

Dirk Roos、Jaap D van Buul、Anton TJ Tool、Juan D Matute、Christophe M Marchal、Bu'Hussain Hayee、M Yavuz Köker、Martin de Boer、Karin van Leeuwen、Anthony W Segal、Edgar Pick 和 Mary C Dinauer

研究背景：慢性肉芽肿病（CGD）是一种罕见的免疫缺陷病，由白细胞 NADPH 氧化酶缺陷引起。这种酶产生超氧化物，这是吞噬白细胞杀死细菌和真菌所必需的。^{大多数 CGD 患者的 CYBB 存在突变，CYBB 是编码 gp91 phox}的 X 连锁基因，gp91 phox 是白细胞 NADPH 氧化酶的催化亚基。我们在这里报告了来自两个家庭的三名常染色体隐性遗传 CGD 患者，其NCF2存在纯合突变，该基因编码 p67 ^phox（NADPH 氧化酶的激活亚基）。

方法：采用标准方法测定白细胞NADPH氧化酶活性、氧化酶成分表达量和基因序列。患者NCF2基因中发现的突变在K562细胞中表达为Ala202Valp67 ^{phox ，以测量其对NADPH氧化酶活性的影响。}通过共聚焦显微镜和膜纯化后的蛋白质印迹法测量突变的p67 ^phox从患者中性粒细胞的胞浆到质膜的易位。

结果：本文报道的 A67 CGD 患者的特殊特征是 p67 ^phox激活结构域中的 p.Ala202Val 突变明显低位：注意到 p67 ^phox蛋白的大量表达，并且患者中性粒细胞中的 NADPH 氧化酶活性为正常值的 20-70%，取决于用于激活细胞的刺激。^{在细胞激活过程中，Ala202Val-p67 phox}易位至质膜的程度也是刺激依赖性的。与用野生型 p67 phox 转染的细胞相比，K562 细胞中的 Ala202Val-p67 phox 介导的氧化酶活性仅为正常氧化酶活性的^约3 ^%。

结论：NCF2中发现的突变是导致 NADPH 氧化酶活性降低和患者出现（轻度）临床问题的原因。我们认为p.Ala202Val突变改变了p67 ^phox激活域的构象，导致gp91 ^phox激活减少。