克隆与转基因
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抽象的

在研究实验室中使用简单、廉价的体外模型研究慢性粒细胞白血病

Raghda Elsawi、Eman Abd El Moemen Mohammed、Noha Mohsen Abogresha、Manal Said Fawzy 和 Somaya Hosny

背景：慢性粒细胞白血病（CML）是最常见的与复发性染色体畸变（费城染色体上融合bcr-abl基因）相关的肿瘤，目前使用的产生bcr-abl基因的方法非常昂贵，并且在实验室条件有限的情况下不可行。设施。因此本研究旨在使用一种简单、安全且廉价的方法来生成bcr-abl基因以用于CML研究。

方法：评估两组Bcr-abl表达情况；用 P210pcDNA3 质粒进行核转染的脐带血 CD34+HSC (UCBCD34+HSC) (n=5) 和用 GFP 编码质粒 (pMAX-GFP) 进行核转染的 UCBCD34+HSC (n=5)。然后，进行新霉素（G418）抗生素选择。通过对白细胞介素一受体辅助蛋白（IL1RAP）基因的表达进行定量PCR分析来评估G418抗性P210pcDNA3 UCBCD34+HSC克隆中bcr-abl基因的稳定表达。新发现IL1RAP基因在bcr-abl阳性细胞表面表达。

结果：与 pMAX-GFP 克隆相比，G418 抗性 P210pcDNA3 克隆的 IL1RAP 基因表达增加了 11 倍。我们的结果证明了传统质粒的核转染可能如何诱导 HSC 中的基因表达。

结论：这种产生表达 bcr-abl 基因的 CD34+ HSC 的简单方法将为慢性粒细胞白血病研究开辟新的收入，特别是在没有装备先进且昂贵的癌症研究的实验室。此外，bcr-abl +CD34+HSC 表面上的 IL1RAP 过度表达可用作成功稳定 bcr-abl 表达的指标。