蛋白质组学与生物信息学杂志
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将磁珠分离/MALDI-TOF 质谱法应用于人泪液蛋白质组分析

关山英一、松山由美子、肥后大辅、韭泽隆、池川雅也、木下茂、田代圭

眼泪中的蛋白质和肽在保持眼表的完整性和稳定性方面发挥着重要作用。蛋白质组分析泪膜的分析将使我们能够检测眼部疾病的早期生物标志物，然而，它常常受到泪液量小和蛋白质浓度低的阻碍。在这里，我们采用基于磁珠的纯化（ClinProt 系统），然后采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）来分析人类泪液蛋白。使用玻璃微毛细管从正常健康志愿者收集基础泪液和反射泪液。应用反相 (C8) 和弱阳离子交换 (WCX) 磁珠以获得多种被检测为清晰信号的成分。主成分分析显示基底泪液和反射泪液之间存在明显区别。在关键的变化中，反射性泪液中的两个峰值显着增加，分别为 m/z 2422.12 和 m/z 2721。随后通过串联 MS 分析对 29 个进行了分析，其来源为富含脯氨酸的蛋白 4 (PRP4)。我们得出的结论是，基于磁珠的分离与 MALDI-TOF-MS (ClinProt MALDI-TOF) 相结合似乎非常适合泪液中肽和蛋白质的一线筛选。