临床与实验眼科学杂志
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抽象的

人脂肪干细胞沿角质细胞谱系的体外分化

张世佳、Ladan Espandar、Kathleen MP Imhof 和 Bruce A. Bunnell

目的：通过与原代角膜细胞体外共培养，评估人脂肪源性干细胞（hASC）向角膜细胞谱系的分化。
材料和方法：开发了一种共培养系统，使用 Transwell 插入物在角膜细胞分化培养基 (KDM) 中在底部生长 hASC，在顶部生长角膜细胞。在完全培养基（CCM）和KDM中培养的hASC用作对照。16 天后，通过细胞计数检查 hASC 的形态变化和增殖情况。采用qRT-PCR和流式细胞仪检测乙醛脱氢酶3家族成员A1（ALDH3A1）和角蛋白的表达。
结果：相对于 CCM 和 KDM，hASC 在共培养系统中变得更加树突状且伸长。随着分化的进行，细胞的倍增时间更长。qRT-PCR 显示共培养系统中 ALDH3A1 和 keratocan 表达增加的明确趋势，尽管 p 值在统计上不显着。流式细胞术显示，相对于CCM组（p<0.001），甚至相对于KDM组（ALDH3A1 p<0.001，keratocan p<0.01），共培养系统中ALDH3A1和keratocan的蛋白水平显着增加。
结论：共培养方法是一种在体内应用之前诱导干细胞群分化的有前途的方法。这项研究揭示了使用自体多能干细胞进行角膜组织生物工程的重要潜力。