酶工程
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抽象的

通过酶发现基因突变：用于简单且高度精细的酶错配切割方法的芯片

沃斯卡里德斯·K

模糊 DNA 多样性的保证是原子科学众多领域中有意义的事情之一。因此，桑格测序已被应用于日常实践中。尽管如此，当您需要查看大量的估计 DNA 或大量样本时，这种策略很麻烦、成本高昂且乏味。最近，未来测序 (NGS) 已被用于变化筛查背后的不同目的。这项巨大的测序技术适用于基因组大小的筛选，以及筛选导致比较聚集的特征列表，例如青少年糖尿病（MODY）。如果立即收集足够的样本，NGS 是一个令人愉快且迷人的系统，因为测试池可以降低每个测试的运行成本。然而，如果您希望通过一次试验检查 10~50 kb 的 DNA 分组，则您需要高效且有用的筛选策略。一般来说，单链适应多态性 (SSCP)、异源双链体研究 (HA) 是最常用的技术。然而，这些技术的影响力对于彻底的试验来说是不可接受的。尽管已经提供了大量基于 PCR 的改变的转化筛选策略，但由于影响力或潜在负担较低，这些策略都没有变得众所周知。HA 的两种改变策略，变性角凝胶电泳 (DGGE) 和温度角凝胶电泳 (TGGE)，旨在通过改变凝胶部分或温度来改善异源双链 DNA 在凝胶中的重新定位延迟。尽管这些策略可能比 HA 具有更佳的地位，但它们需要特殊的设备来运行或制造凝胶。如此看来，这些调整后的技术并没有像第一个HA那样出名。变性精液色谱 (DHPLC) 是一种便携式移动检测，不包括电泳，而是根据 HPLC 部分中异源双链体的维护时间的缩短来区分变化。尽管这项新的创新实现了很高的影响力，为了获得最大的影响力，需要对每个DNA分组的变化识别条件进行繁琐的改进。理想的转化筛选技术需要传统的硬件和试剂；单独的约定可以应用于任何 DNA 分组和变化类型；并将实现高影响力、高吞吐量和高费用执行。复合劈裂 (EMC) 可能满足这些标准。