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过表达 L-阿拉伯糖异构酶用于生产低热量大量甜味剂 D-塔格糖

Monika Van Holsbeeck、Efstathia Tsakali、Evelien Syryn、Guido Aerts、Jan Van Impe 和 Ilse Van de Voorde

高细胞密度培养显示出生产重组蛋白的巨大潜力，其数量远远超过自然资源的可获得性。重组蛋白的一个有趣的例子是 L-阿拉伯糖异构酶，它能够将 D-半乳糖转化为低热量和低血糖的大量甜味剂 D-塔格糖。在这项研究中，来自嗜热脂肪地芽孢杆菌的 L-阿拉伯糖异构酶在大肠杆菌的细胞内表达。培养基含有葡萄糖、酵母提取物和各种常量和微量营养素。研究了空气流量对大肠杆菌生长和L-阿拉伯糖异构酶表达的影响。52 小时后，通过将空气流量调节在 0.2 至 30 L min-1 之间，光密度和干细胞重量分别达到 154 ± 4 和 54.8 ± 1.3 g L-1。相应的 L-阿拉伯糖异构酶活性达到 6.99 ± 0.46 U mL-1。高细胞密度培养的一个缺点是会产生可能抑制生长的副产物乙酸。然而，发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。达到 46 U mL-1。高细胞密度培养的一个缺点是会产生可能抑制生长的副产物乙酸。然而，发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。达到 46 U mL-1。高细胞密度培养的一个缺点是会产生可能抑制生长的副产物乙酸。然而，发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。高细胞密度培养的一个缺点是会产生可能抑制生长的副产物乙酸。然而，发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。高细胞密度培养的一个缺点是会产生可能抑制生长的副产物乙酸。然而，发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。发酵过程中乙酸浓度保持尽可能低，以避免该化合物固有的抑制作用。产生的 L-阿拉伯糖异构酶的转化率为 37.1 ± 1.5%，相当于 94.9 ± 3.7 g L-1 D-塔格糖。因此，高细胞密度培养的实施导致了L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和D-塔格糖的产生。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。高细胞密度培养的实施导致了 L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和 D-塔格糖的生产。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。高细胞密度培养的实施导致了 L-阿拉伯糖异构酶的有效表达和 D-塔格糖的生产。还研究了细胞在 4°C 下几个月的储存稳定性。在 4°C 下储存至少 8 个月期间，观察到稳定的 L-阿拉伯糖异构酶。