酶工程
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单相水性有机介质中木瓜蛋白酶催化的寡聚反应 - 中性和极性氨基酸低聚物的合成和表征

Srinivasan SK、Kapila S、Daniel F 和 Nam 

寡肽的合成通常在水性或双相反应介质中进行；单相反应介质的使用相当有限。在本研究中，通过木瓜蛋白酶催化反应在乙腈/水组成的单相体系中合成了赖氨酸（Lys）、甘氨酸（Gly）、蛋氨酸（Met）和酪氨酸（Tyr）的同源寡肽。反应条件针对肽键形成进行了优化，并最大限度地减少酶变性。这种介质特别有吸引力，因为它们可以分别最大限度地减少酰基复合物和寡肽的二次水解和反向水解。合成的寡肽通过反相液相色谱（RPLC）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）进行纯化和表征。所有氨基酸的寡肽产率约为 80%。还研究了木瓜蛋白酶在乙腈/水介质中的立体特异性。使用手性高压液相色谱 (HPLC) 对分离的蛋氨酸对映体进行表征。结果表明木瓜蛋白酶的 L-特异性在单相培养基中得以保持。