酶工程
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抽象的

通过固定在磁性载体上的环糊精糖基转移酶的再利用

凯特·克里斯蒂娜·布兰科、弗朗西斯科·何塞·多斯桑托斯、纳塔利娅·索扎·贝尔纳迪、米格尔·贾费利奇·朱尼尔、鲁本斯·蒙蒂和乔纳斯·康泰罗

从巴西圣保罗州一家木薯面粉厂的废水中分离出的勒氏芽孢杆菌 (Bacillus lehensis) 中的 CGT 酶在使用硫酸铵沉淀进行部分纯化后被固定化。部分纯化的CGTase通过共价结合固定在磁铁矿载体上，用3-氨基丙基三甲氧基硅烷硅烷化并用戊二醛活化，得到16.27%的产率和初始活性的17.54%的最终活性。测定了勒恩氏芽孢杆菌环糊精糖基转移酶的理化性质和动力学。固定化CGTase的最适温度高于可溶性酶的最适温度（分别为70°C和55°C）。固定化酶的最适pH与可溶性酶相同(pH 8.0)。在 pH 和热稳定性测定中，24小时后酶活性保持50%，160分钟后酶活性保持26.22%。米氏常数为 0.82 mg.ml-1，最大速度为 45.45 mol.ml−1.min−1。在四次循环后固定化酶的再利用研究中，仍保持了16.66%的初始催化活性，证明了固定化在磁铁矿上的酶具有回收和再利用的能力。